GA/T 1965-2021 法庭科学 硅藻rbcL基因特异片段检测 毛细管电泳荧光检测法.pdf

ICS13.310 CCS A 92 GA 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T1965-2021 法庭科学硅藻rbcL基因特异片段检测 毛细管电泳荧光检测法 Forensic science-Methods for detection of rbcL gene of diatom- Capillary electrophoresis and fluorescence method 2021-10-14发布 2022-05-01实施 中华人民共和国公安部 发布 GA/T1965—2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由全国刑事技术标准化技术委员会(SAC/TC179)提出并归口. 本文件起草单位：广州市刑事科学技术研究所、中山大学、广东省公安厅. 本文件主要起草人：刘超、徐曲毅、刘宏、赵建、肖成、李越、汪冠三、刘长晖、杨幸怡、徐际超. I GA/T1965-2021 法庭科学硅藻rbcL基因特异片段检测 毛细管电泳荧光检测法 1范围 本文件规定了法医物证检验水中尸体组织中硅藻的材料准备、操作方法、聚合酶链式反应(Poly- merase chain Reaction PCR)扩增硅藻叶绿体核酮糖-1 5-二磷酸羧化酶大亚基基因特异片段和实时荧 光定量检验结果判定及注意事项. 本文件适用于法庭科学检验中对硅藻bcL基因片段的检验. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于 本文件. GA/T382一2014法庭科学DNA实验室建设规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 rbcL基因rbcL gene 叶绿体核酮糖-1 5-二磷酸羧化酶大亚基基因. 4原理 在溺死过程中，肺泡-毛细血管屏障损伤导致水中的浮游生物（如硅藻）随溺液进入血液循环，从而 到达人体内各器官.检测这些浮游生物的存在，可用于诊断溺死.溺死相关硅藻（舟形藻、菱形藻、小环 藻、变异直链藻、针杆藻、骨条藻等)的叶绿体中含有bcL基因，该基因片段与人类及共生菌没有同源 性.在水中尸体的体循环器官（肝脏或肾脏）中检测到该基因的特异片段，可证实溺死相关硅藻脱氧核 糖核酸(Deoxyribonucleic Acid DNA)的存在. 5仪器设备 包括： a)可调微量移液器(2pL、10pL、100μL、1000gL); b)高速台式冷冻离心机，可控温至4℃且离心速度可达12000r/min以上； c)PCR扩增仪； d)实时荧光定量PCR扩增仪； e)毛细管电泳仪； 1 ...