ICS07.120 CCS C04 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T41212-2021/ISO/TS19006:2016 纳米技术 荧光素二乙酸酯法检测 纳米颗粒诱导巨噬细胞产生的活性氧 Nanotechnologies-5-(and 6)-Chloromethyl-2' 7'Dichloro-dihydrofluorescein diacetate (CM-H2 DCF-DA)assay for evaluating nanoparticle-induced intracellular reactive oxygen species (ROS)production in RAW 264.7 macrophage cell line (ISO/TS19006:2016 IDT) 2021-12-31发布 2022-07-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布 刮涂泉真伪 GB/T41212-2021/ISO/TS19006:2016 目 次 前言…… I 引言……………… 1范围…… ] 2规范性引用文件…………………… 3术语和定义… 1 4符号和缩略语…… 5材料…………… 6技术设备………… ..……………4 7纳米颗粒样品制备…… ……………………………………4 8准备工作 8.1概述 8.2流式细胞仪校准…… ………6 8.3实验培养基……… ……………………………6 8.4试剂制备 8.5细胞培养物的准备…… ……6 8.6准备实验用的培养物………………………………6 8.7检测细胞生长状态……………… …6 8.8评估纳米颗粒的干扰…………… …………7 8.9对照组的准备 ………8 8.9.1概述……… …………………………………………8 8.9.2对照组说明 ………8 8.9.3Sin-1储备溶液制备(1mM) ……………………………8 9评价纳米材料对细胞内ROS产生的影响……………… …………8 9.1准备24孔板中的细胞…… ………8 9.2用对照物和不同浓度纳米颗粒处理细胞 ………8 9.3CM-H2DCF-DA细胞暴露…… ………9 9.4用CM-H2DCF-DA孵育细胞…… ……9 9.5流式细胞仪分析 ………9 10数据分析和结果 ……10 附录A(资料性)替代细胞系…… ……………11 附录B(资料性)可替代的荧光表征技术…… …………12 附录C(资料性)悬浮液的制备和表征………………………13 附录D(资料性)来自RAW264.7的实验数据示例 …………………………………14 参考文献 16 GB/T41212-2021/ISO/TS19006:2016 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 本文件使用翻译法等同采用ISO...
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