ICS65.020.20 CCS B 16 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2617-2022 冬生疫霉病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Phytophthora hibernalis Carne 2022-07-07发布 2023-02-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T2617-2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海海关、中华人民共和国南宁海关、 中华人民共和国天津海关. 本文件主要起草人:吴品珊、雷荣、焦彬彬、闫正跃、罗加凤、杨翠云. I SN/T2617-2022 冬生疫霉病菌检疫鉴定方法 1范围 本文件描述了植物检疫中冬生疫霉病菌Phytophthora hibernalis Carne的检疫鉴定方法. 本文件适用于针对冬生疫霉寄主的植株和果实以及夹带土壤的检疫鉴定. 2规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件. 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. 4病原菌基本信息 学名:Phytophthora hibernalis Carne 分类地位:真核生物域(Eukaryota Domain) 菌藻界(Chromista) 卵菌门(Oomycota) 霜霉纲 (Peronosporea) 霜霉目(Peronosporales) 霜霉科(Peronosporaceae) 疫霉属(Phytophthora). 传播途径:主要通过感病寄主、土壤和水流传播扩散.短距离传播为孢子囊借助灌溉、溅射的水、风 雨或蜗牛传播,贸易性调运寄主苗木、果实是病菌远距离传播的主要方式. 寄主范围:主要为柑橘属植物,还可侵染杜鹃等植物. 病菌的其他信息参见附录A. 5方法原理 依据病害症状、分离菌的形态特征和分子生物学特性,用常规PCR或荧光PCR特异性引物扩增冬 生疫霉病菌的ITS(internal transcribed spacer)基因,或用重组酶聚合酶扩增(Rebinase Polymerase Amplification RPA)特异性引物扩增ras-related Yptl基因,对冬生疫霉病菌进行综合检疫鉴定. 6仪器和用具 6.1仪器 生物显微镜、体视显微镜、纯水仪、光照培养箱、高压灭菌锅、超净工作台、制冰机、PCR仪、实时荧 光PCR仪、恒温扩增仪、凝胶成像系统、电泳仪、电子天平(感量0.01g)、冰箱. 6.2用具 烧杯、三角瓶、量筒、试管、培养皿、酒精灯、镊子、剪刀、解剖刀、载玻片、盖玻片、塑料研杵、移液器、...
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