ICS11.020 CCS C62 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5173—2021 国境口岸婢传腹地病毒 实时荧光RT-PCR检测方法 Real-time RT-PCR method for detecting Heartland Virus in ticks at frontier ports 2021-06-18发布 2022-01-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5173-2021 前言 本文件按照GBT1.1一2020《标准化工作导则第1部分标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国合肥海关、中华人民共和国重庆 海关、中华人民共和国扬州海关、中华人民共和国广州海关. 本文件主要起草人:刘丽娟、石泉、骆星丹、王春、张晓龙、王静、慈颖、杨宇、郭天宇、戴俊. I SN/T5173-2021 国境口岸蜱传腹地病毒 实时荧光RT-PCR检测方法 1范围 本文件规定了国境口岸蜱传腹地病毒实时荧光RT-PCR检测方法,包括样本前处理、检测程序、 方法、结果判定及报告. 本文件适用于检验检疫机构对人及蜱携带腹地病毒的核酸检测. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)租 用于本文件. GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T1293国境口岸蜱类监测规程 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 人间传染的病原微生物名录(中华人民共和国卫生部卫科教发〔2006]15号) 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1腹地病毒Heartland virus HRTV 单股负链节段性RNA病毒,属于布尼亚病毒科的白蛉病毒属,有S、M和L片段.其中,L片 段编码RNA依赖性RNA多聚酶,M片段编码糖蛋白Gn和Gc S片段编码核衣壳蛋白和非结构蛋白. 腹地病毒主要经蜱传播,经蜱叮咬后,人可出现发热及血小板减少等症状. 3.2逆转录聚合酶链反应reverse transcription polymerase chain reaction;RT-PCR 将RNA逆转录(RT)和CDNA聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术.本标准采用一步法逆转 录聚合酶链式反应(RT-PCR).在一步法RT-PCR中,首先以RNA为模板,利用下游特异性引物, 在依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)作用下转录合成互补DNA(CDNA) 该步骤称作“逆转录”; 随后,再以CDNA为模板,利用上游和下游特异性引物,在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增; 最终使RNA分子的某个特定区域(目的...