ICS11.020 CCS C62 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5178—2021 按蚊属分子鉴定方法 Molecular identification for genus Anopheles 2021-06-18发布 2022-01-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5178—2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位：中华人民共和国南京海关、中华人民共和国福州海关、中华人民共和国北京 海关、中国检验检疫科学研究院. 本文件主要起草人：杨庆贵、何江、朱军、吴瑜凡、孙立新、张建庆、郭惠琳、黄恩炯、胡双双、 聂国媛、袁大炜、郭天宇、陆永昌. I SN/T5178-2021 按蚊属分子鉴定方法 1范围 本文件规定了按蚊(Anopheles Meigen.1818)成虫（包括肢体残缺不全的成虫）及蛹、幼虫、卵的. 本文件适用于按蚊属分子的鉴定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件，不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适 用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T1876医学媒介生物标本采集、制作及保存规程 SN/T2752.4卫生检疫人员的自我防护规范第4部分：实验室人员 SN/T4278国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定操作规程 SN/T4629检疫性有害生物凭证标本核酸制备、保存与管理规范 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 3术语和定义 SN/T4629和SN/T4278界定的术语和定义适用于本文件. 4原理 利用BOLD中规定的通用引物对线粒体DNA中的COI基因的特定片段进行扩增，PCR产物克隆 或者直接测序后，得到长度不少于500bp的有效序列，跟BOLD系统中的数据进行比对，从而达到 物种快速准确鉴定的目的. 5引物 LCO1490 5'-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3' HCO21985'-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3’ 6鉴定程序 6.1准备 实验室需具备的设备和试剂见附录A 实验室生物安全应符合GB19489(部分)中的规定， 人员防护应符合SN/T2752.4(部分)中的的规定；PCR防污染措施应按照WS/T230确定的执行. 1 ...
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