ICS11.020 CCS C62 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5179—2021 二代测序法检测蜚蠊携带细菌性样品 制备方法 Protocol for sample preparation of cockroach-borne bacteria detection with next-generation sequencing 2021-06-18发布 2022-01-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5179—2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位：中华人民共和国拱北海关. 本文件主要起草人：陈健、邱德义、刘恭源、魏晓雅、刘德星、李婷婷、岳巧云. I SN/T5179—2021 二代测序法检测蜚蠊携带细菌性样品 制备方法 1范围 本文件规定了蜚蠊携带细菌性样品进行二代测序检测的样本采集、前处理、体内外携带细菌的 收集及基因组DNA的获取和扩增等操作程序. 本文件适用于利用二代测序技术对本底调查或口岸截获的蜚蠊携带未知细菌进行高通量检测鉴 定的样品制备工作. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单） 适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T2752.4卫生检疫人员的自我防护规范第4部分：实验室人员 SN/T4278一2015国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定操作规程 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 引物标记primer marker 在常规引物5'端加入的一段6~12个随机设计的碱基序列，用于标记并区分特定样品的扩增反应. 3.2 标签引物labeled primer 由引物标记加常规引物两部分构成，每一个样品进行PCR扩增时需保证使用的一对引物中，至 少有一条与其他样品使用的引物标记不同. 3.3 高成功率PCR酶high success rate PCR polymerase 可成功扩增普通Tag DNA聚合酶难以扩增样品的一类新型DNA聚合酶.针对含多种PCR扩增抑 制物质的粗样品，该酶具有优良的延伸性.常见的有KOD FX系列等. 4要求 实验室的生物安全应符合GB19489要求，实验室人员防护应符合SNT2752.4要求，实验中用水 1 ...
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