ICS05.150 CCS B41 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5186—2020 鲍脓疱病检疫技术规范 Quarantine protocol for abalone pustule disease 2020-12-30发布 2021-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5186-2020 鲍脓疱病检疫技术规范 1范围 本文件规定了鲍脓疱病的临床诊断、病原分离、生化鉴定、PCR检测法和荧光PCR检测法. 本文件适用于鲍脓疱病的病原检测. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适 用于本文件. GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出入境动物检疫采样 GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求 SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. 4概述 鲍脓疱病由河弧菌感染所致，主要感染3cm~5cm的稚幼鲍，夏季连续高温季节发病频繁，持 续时间长，死亡率高，在海南省及全国各地造成极其严重的经济损失.河弧菌是一种嗜盐菌，革兰染 色阴性，顶端单鞭毛，具动力.本菌可产生肠毒素和细胞毒素.本菌对多数广谱抗菌药物敏感，但耐 青霉素及头孢类抗生素. 患脓疱病的鲍可见足肌上有若干个微微隆起的白色脓疱.脓疱的形状基本上为三角形，病灶是从 腹足的下表面开始逐渐扩大、深入到足的内部.开始时，病灶较小，随着病程的进展，病灶逐渐扩大. 临床检疫要求参见附录A. 5.试剂和仪器设备 5.1试剂 5.1.1除另有规定外，试验所需化学试剂均应为分析纯. 5.1.2试验用水应符合GB/T6682中一级水的规格，用于DNA提取及PCR试验的试验用水需用灭 菌双蒸水. 5.1.3培养基. SN/T5186-2020 5.1.4生化鉴定试剂：精氨酸二氢酶、赖氨酸脱梭酶、鸟氨酸脱梭酶、脲酶、糖发酵管、微量生化 管、生化鉴定试剂条或试剂盒等. 5.1.5细菌基因组提取试剂盒. 5.1.6PCR引物序列如下： —F1:5'-GCCTGACTCAAGCCATCTCAACCC-3'; —R1:5'-CTGTTGGTTGCCGTCATACTGCCT--3'. 5.1.7实时荧光PCR引物和探针： —F2:5’-GACGCTTGGCAGTGTTCAAC-3'; —R2:5'-GTGCATTCCACCATATTTTCTTACG-3'; —探针：5’(FAM)-TGTCAGCACGCCAATCAATCACCCG(TAMRA)-3'. ...
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