ICS11.220 CCS B41 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5191—2020 禽肾炎检疫技术规范 Quarantine protocol for avian nephritis 2020-12-30发布 2021-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5191-2020 禽肾炎检疫技术规范 1范围 本文件规定了禽肾炎的病毒分离及鉴定、反转录-聚合酶链式反应、实时荧光反转录-聚合酶 链式反应和间接酶联免疫吸附试验的技术要求. 本文件适用于禽肾炎的检疫. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适 用于本文件. GB/T6682分析试验室用水规格和实验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 3术语、定义和缩略语 本文件没有需要界定的术语和定义.下列缩略语适用于本文件. AN:禽肾炎(avian nephritis); ANV:禽肾炎病毒(avian nephritis virus) 4临床诊断 4.1禽肾炎简介 禽肾炎简介参见附录A. 4.2临床症状 本病可明显抑制1月龄以内雏鸡生长发育和增重，其他症状不明显.一般呈一过性隐性感染，本病 经人工接种无特殊病原微生物雏鸡后，血浆中尿酸盐浓度高于正常浓度的2~10倍，21d后恢复正常. 4.3病理变化 本病的病理变化主要表现于肾脏，其他脏器一般没有变化.随年龄增大，病变程度减轻，4日龄 内的雏鸡病变最为严重，甚至会出现死亡情况.剖检死亡的雏鸡，见到肾脏、脾脏和腹膜表面及腿部 筋腱周围大量的尿酸盐沉积，2月龄仅发生较轻肾炎病变. 根据流行病学、临床症状和病理变化可做出禽肾炎的初步诊断，进一步的确诊有赖于实验室诊断. 5实验室诊断 5.1生物安全措施 1 SN/T5191-2020 试验环境和防护要求见GB19489. 5.2病原分离及鉴定 5.2.1材料和试剂 5.2.1.1器材 生物安全柜、离心机、二氧化碳培养箱、冷冻高速离心机、研磨器、倒置显微镜等. 5.2.1.2水 符合GB/T6682中一级水要求. 5.2.1.3试剂 胰酶消化液、细胞生长液、细胞维持液、双抗液，具体配制见附录B.1~B.4. 5.2.1.4细胞 鸡肾细胞(CKC). 5.2.2病毒分离培养 5.2.2.1样品采集和制备 5.2.2.1.1未出现临床症状时，活禽无菌采集病鸡泄殖腔拭子（需带有可见粪便）.雏禽采集新鲜粪便； 在动物死亡后，无菌采取肾脏和直肠内容物作病料. 5.2.2.1.2样品置于含抗生素的pH7.0等渗磷酸盐缓冲液(PBS)中. 5.2.2.1.3粪便和搅碎的组织，用含抗生素的PBS制成10%~20%（质量浓度的悬浮液，拭子浸入3mL...
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