ICS11.220 CCS B41 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5198—2019 熊蜂短膜虫检疫技术规范 Quarantine protocol for Crithidia bombi 2020-12-30发布 2021-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5198—2020 熊蜂短膜虫检疫技术规范 1范围 本文件规定了熊蜂短膜虫检疫的聚合酶链式反应和实时荧光聚合酶链式反应检测技术. 本文件适用于熊蜂短膜虫的检疫. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单） 适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语、定义和缩略语 本文件没有需要界定的术语和定义.下列缩略语适用于本文件. Ct 循环阈值(cycle threshold) DNA 脱氧核糖核酸(deoxyribonucleie acid) dNTP 三磷酸脱氧核苷酸(deoxynucleoside triphosphate) EB 溴化乙锭(ethidium bromide) ITS 内转录间隔区(internal transcribed space) PCR 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction) TBE 三羟甲基氨基甲烷-硼酸-乙二胺四乙酸(trihydroxymethyl aminomethane--boric acid- ethylene diamine tetraacetic acid TE TE缓冲液(Tris-EDTA buffer solution) 4设备、材料和试剂 4.1设备 4.1.1高压灭菌锅. 4.1.2梯度PCR扩增仪. 4.1.3荧光PCR仪. 4.1.4高速冷冻离心机（转速12000r/min) 4.1.5微量移液器. 4.1.6生物安全柜. 4.1.7DNA相对分子质量标准品(100bp~1000bp) 4.1.8水平电泳仪. 4.1.9凝胶成像系统. 4.1.10电子天平（感量0.01g). SN/T5198—2020 4.1.11冰箱(2℃~8℃和-20℃). 4.2试剂 4.2.1水：符合GB/T6682中一级水的规格. 4.2.2液氮. 4.2.3无水乙醚. 4.2.4无水乙醇. 4.2.50.01mol/L磷酸盐(PBS)缓冲液，配制方法见附录A中A.1. 4.2.610%SDS溶液，配制方法见附录A中A.2. 4.2.7蛋白酶K. 4.2.85mol/L的NaC1溶液，配制方法见附录A中A.3. 4.2.9CTAB/NaC1溶液，配制方法见附录A中A.4. 4.2.10三氯甲烷/异戊醇混合液，配制方法见附录A中A.5. ...
SN/T 5198-2020 熊蜂短膜虫检疫技术规范.pdf
