ICS11.220 CCS B41 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5338—2021 虎物种鉴定实时荧光PCR方法 Identification for tiger species-Real-time PCR method 2021-06-18发布 2022-01-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5338-2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位:中华人民共和国杭州海关、中华人民共和国宁波海关、中华人民共和国绍兴海关. 本文件主要起草人:吴姗、赵秀玲、张明哲、虞惠贞、尹文秀、张晓峰、任明兴、孙超、张荃. I SN/T5338-2021 虎物种鉴定实时荧光PCR方法 1范围 本文件规定了虎种(Panthera tigris)的实时荧光PCR鉴定方法. 本文件适用于虎种内现存的6个亚种虎,包括东北虎(Panthera tigris altaica)、华南虎(Panthera tigris amoyensis)、孟加拉虎(Panthera tigris tigris)、印度支那虎(Panthera tigris corbetti)、马来虎 (Panthera tigris jacksoni)和苏门答腊虎(Panthera tigris sumatrae)及其制品的定性鉴定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于 本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语、定义和缩略语 3.1术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1.1 实时荧光PCR real-time PCR 在PCR扩增时加入带有荧光基团的特异性探针(Tagman探针)或荧光染料,使PCR产物的积累 与荧光信号的积累完全同步,实现PCR产物的实时监测. 3.1.2 Ct值cycle threshold value 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数. 3.2缩略语 下列缩略语适用于本文件. bp:碱基对(base pair) CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrithylammonium bromide) Cytb基因:高等生物细胞中线粒体的细胞色素b基因(cytochrome 6) DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid) dNTP:脱氧核苷酸三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate) EDTA:乙二胺四乙酸(ethylene diaminetetraacetic acid) FAM:6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein) OD:光密度值(optical density) PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction) ROX:羧基-X-罗丹明(carboxy-X-rhoa mine) ...