ICS65.020.01 CCS B 16 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5386—2021 葡萄灰皮诺病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Grapevine Pinot gris virus 2021-06-18发布 2022-01-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5386-2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位:中华人民共和国北京海关、北京爱普拜生物技术有限公司、中国检验检疫科学研 究院. 本文件主要起草人:邓丛良、赵晓丽、向军、郑祖亮、刘兴亮、郑春生、吕玉峰. I SN/T5386-2021 葡萄灰皮诺病毒检疫鉴定方法 1范围 本文件规定了葡萄灰皮诺病毒的检疫鉴定方法. 本文件适用于可能带有葡萄灰皮诺病毒的葡萄苗木、接穗及其产品的检疫鉴定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于 本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 微滴式数字PCR droplet digital PCR 一种核酸单分子扩增技术,基于扩增前将混匀的PCR反应液被微滴发生器分成数万个单独的微反 应,核酸分子分布在不同的微反应中,独立进行单分子PCR扩增,降低了可能存在的竞争,待荧光PCR 反应结束后,逐一检查每个微滴是否有扩增发生,就可以精确测得待测DNA或RNA模板的分子数. 注:不同于常规PCR和实时荧光PCR技术,该技术不需要制作标准曲线,也与待测分子PCR扩增效率无关,可以 直接测出样品中待测核酸模板的绝对数目,实现了DNA或RNA的绝对定量. 4葡萄灰皮诺病毒基本信息 学名:Grapevine Pinot gris virus. 缩写:GPGV. 分类地位:线形病毒科(Betaflexiviridae) 纤毛病毒属(Trichovirus). 传播途径:主要通过嫁接传播和机械传播. 葡萄灰皮诺病毒的其他信息参见附录A. 5方法原理 根据该病毒基因组特异性进行普通RT-PCR、实时荧光RT-PCR和数字RT-PCR检测,通过电泳 条带大小、扩增曲线、产生微滴的变化和基因组序列进行结果判定. 1 ...