ICS07.100.30 CCS X04 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5516.13—2023 出口食品中致病菌荧光重组酶介导链替换 核酸扩增(RAA)检测方法 第13部分：蜡样芽孢杆菌 Real-time rebinase-aid amplification detection method for pathogens in export food-Part 13:Bacillus cereus 2023-05-05发布 2023-12-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5516.13-2023 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 本文件是SN/T5516《出口食品中致病菌荧光重组酶介导链替换核酸扩增(RAA)检测方法》的第 13部分.SN/T5516已经发布了以下部分： —第1部分：沙门氏菌； —第2部分：志贺氏菌； 第3部分：金黄色葡萄球菌； —第4部分：副溶血性弧菌； —第5部分：克罗诺杆菌属； 第6部分：大肠埃希氏菌0157； —第7部分：产志贺毒素大肠埃希氏菌； 第8部分：空肠弯曲菌； —第9部分：单核细胞增生李斯特氏菌； —第10部分：小肠结肠炎耶尔森氏菌； 第11部分：肺炎克雷伯氏菌； 第12部分：铜绿假单胞菌； —第13部分：蜡样芽孢杆菌； —第14部分：产气英膜梭菌； —第15部分：霍乱弧菌； —第16部分：创伤弧菌. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位：中华人民共和国石家庄海关、中华人民共和国上海海关、中华人民共和国西安 海关. 本文件主要起草人：刘立兵、孙晓霞、员丽娟、申进玲、王建昌、项佳林、王金凤、姜彦芬、陈敏娜. I SN/T5516.13-2023 出口食品中致病菌荧光重组酶介导链替换 核酸扩增(RAA)检测方法 第13部分：蜡样芽孢杆菌 1范围 本文件规定了出口食品中蜡样芽孢杆菌的荧光重组酶介导链替换核酸扩增(RAA)检测方法. 本文件适用于出口食品中蜡样芽孢杆菌的快速筛选. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于 本文件. GB4789.14食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3术语、定义和缩略语 3.1术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 实时荧光RAA real time RAA RAA是一种核酸恒温扩增技术，在恒温下（一般为37℃-42℃），重组酶和寡核苷酸引物结合形成 蛋白-DNA复合物，该复合物能够移动寻找模板DNA中的同源序列，在单链DNA结合蛋白的帮助下， 打开模板DNA的双链结构，在DNA聚合酶的作用下，形成新的双链，产物呈指数级扩增.在2xo探针 中包含一个四氢呋喃残基(THF) 其两侧分别为dT-荧光基团(FAM)和dT-淬灭基团(BHQ-1).探针 3端通过适当的修饰(C3 Spacer)被封闭，以阻止聚合酶的进一步延伸.只有当探针和目的DNA结合 后，核酸外切酶III(Exonuclease III Exolll)能够识别并切除THF残基，并解除3’端阻断，荧光基团和...
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