NY/T 56-1987 谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法.pdf

水解,酸性氨基酸,其他规范
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中华人民共和国国家标准 UDC633.1:543.05 谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法 GB7649-87 Pretreatment method for determination of amino 调整为:NY/f56-198) acids in cereal grains 1适用范围 本标准适用于氨基酸分析仪测定谷物籽粒中氨基酸含量的样品前处理. 2方法原理 谷物籽粒中的氨基酸,系按一定顺序结合成不同类型的肽和蛋白质,因而在测定前要用一定浓度的 酸使蛋白质中肽键断裂,水解成多种氨基酸后,用氨基酸分析仪测定.由于色氨酸在酸性溶液中水解时 易被破坏,须用碱水解. 3仪器设备 3.1分析天平:感量0.0001g. 3.2实验室用粉碎机. 3.3喷灯. 3.4真空泵. 3.5真空规. 3.6 恒温干燥箱. 3.7水解管:用九五料玻璃制的球形管或圆底试管.体积15~20ml. 3.8聚四氟乙烯管:10×100mm. 3.9玻璃试管:615X180mm. 3.10浓缩器(可控温,减压)或真空干燥器. 3.11容量瓶:25ml. 4试剂 除注明者外均为分析纯.配制试剂均用去离子水,电导率大于1m2:. 4.16mol/L盐酸:盐酸(GB622-77) 优级纯,与水按1:1混合. 4.24mol/L氢氧化锂:用水溶解168.8g氢氧化锂(Q/HG12一325-83)、稀释至1000ml. 4.3pH2.2缓冲液:19.6g柠檬酸三钠(HG31298-80)用水溶解后,加入16.5ml盐酸(GB622 一77、优级纯),5ml25%硫代双乙醇,1g苯酚(HG3一1165一78),最后定容至1000ml. -4.4H4.3缓冲液:14.71g柠檬酸三钠(HG3一129880)和2.92g筑化钠(GB126677) 10.50g柠檬酸(HG3一-1108一81),溶解在500ml水中,再加入5ml25%硫代双乙醇,0.1ml辛酸,最 后定容至1000ml. 4.5冷冻剂:液氮或干冰加丙酮(或加乙醇). 中华人民共和国农牧渔业部1987-03-26批准 1987-11-15实施 GB7649-87 5试样制备 5.1取有代表性的样品,用四分法分取25g左右,栋去杂质,带壳籽粒进行脱壳. 5.2将样品放在60一65C恒温干燥箱中.干燥8h左右冷却后在粉碎机中碾碎,全部通过孔径为 0.25mm的筛子,充分混匀后装入磨口瓶中备用. 6:处理方法 6.1酸水解步骤 6.1.1称样 :称取样品30士5mg 准确至0.1mg 置于水解管中,同时另称样品按GB3523一83《谷类、油料作物 种子水分测定法》,测定水分含量. 6.1.2水解 6.1.2.1在水解管内加入6mol/L盐酸10ml 在距管口2cm左右处,用喷灯灼烧并拉一细颈.再将 管子放入冷冻剂中,冷却至溶液呈固体后取出,接在真空泵的抽气管上,使减压至7P(≤5×10: mmHg)后封 6.1.2.2将封好口的水解管放在1101C的恒温干燥箱内,水解22~24h后,取出冷却. 6.1.2.3打开水解管,将水解液定量转移到25ml容量瓶内,定容过滤,吸取滤液1ml 用旋转浓缩器 (45一50C)或置于真空燥器内真空干燥,残留物用1~2m去离子水溶解蒸干,如此反复进行1~2 次,最后次蒸下、加pH2.2缓冲液溶解,供仪器测定. 6.2碱水解步骤 6.2.1称样 称取样品60士5mg准确至0.1mg置于聚四氟乙.烯管内,同时按GB352383测定水分. 6.2.2水解 6.2.2.1在聚四瓶乙烯管内加入4m...

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