中华人民共和国国家标准 UDC633.1:543.06 谷物籽粒色氨酸测定法 GB7650-87 Determination of tryptophan in cereal grains 调整为：NY57-1987 1适用范围 本标准适用于测定谷物籽粒色氨酸含量. 2原理 谷物蛋白质碱解后，降解成肽和游离的氨基酸.在酸性介质中，有硝酸盐存在条件下，色氨酸吲哚 环与对二甲胺基苯甲醛反应，生成蓝色化合物，在一定范围内颜色深浅与色氨酸含量成正比. 3仪器、设备 3.1分析天平，惠量0.1mg. 3.2实验室用粉碎机. 3.3721型分光光度计，或相当的仪器. 3.4离心机，4000r/min. 3.5培养箱. 3.620ml具塞刻度玻璃试管（须校准）. 4试剂 除注明者外均为分析纯.水为蒸馏水. 4.1浓盐酸(GB622一77)，比重1.19. 4.210%盐酸溶液：22.7ml浓盐酸加水至.100ml. 4.35%对二甲胺基苯甲醛(HGB3486-一62)溶液：5g对二甲胺基苯甲醛溶于10%盐酸中，并定容 100ml.. 4.41%硝酸钠(GB636一：77)水溶液(m/V). 注：4℃冰箱中保存，一周内使用有效. 4.510%氢氧化钾(GB2306一80)水溶液(m/V). 4.6 L-色氨酸，层析纯. 4.7L-色氨酸标准溶液：准确称25mgL-色氨酸(105C干燥2h) 加少量0.1mol/L氢氧化钠(GB 629一-81)使之溶解，定量地转移到250ml棕色容量瓶中，用水定容.浓度为100u8/ml. 注：4℃冰箱中保存，一个月内使用有效. 5试样的选取与制备 5.1:选取具有代表性谷物籽粒，挑拣干净，按四分法缩减取样，样量不得少于.20g.籽粒充分风千后 用粉碎机磨碎（带壳籽粒先脱壳），使95%以上通过0.25mm孔径筛. .5.2按GB2906-一82《谷类、油料作物种子粗脂肪测定法》脱脂并测定脂肪含量.脱脂样品风干后， 混匀，装入磨口瓶中备用.， 中华人民共和国农牧渔业部1987-03-26批准 1987-11-15实施 GB7650-87 6校准曲线的绘制 吸L-色氨酸标准溶液0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7ml分别置于20ml具塞刻度玻璃试管中，加1ml 10%氢氧化钾溶液，摇匀；加0.2ml5%对二甲胺基苯甲醛，摇匀；加0.2ml1%硝酸钠，摇匀；将试管置 于冰水中，再加5ml浓盐酸.取出试管，强烈振摇后放入25℃培养箱中显色75min(温度升到25C时记 时)，取出后用水稀释至刻度，摇匀.以试剂空白作对照在590nm波长处测读吸光度.以色氨酸含量 (μg)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制校准曲线.在温度较高的季节和地区，制定校准曲线时，参见附录 A. 7测定步骤 7.1称样：称取40mg试样两份，准确至0.1mg 与此同时，另称样品，按GB3523一83《谷类、油料作 物种子水分测定法》测定水分含量. 7.2水解：将试样置于20ml具塞刻度玻璃试管中，加1ml10%氢氧化钾，振摇，样品全部湿润后，放 入40℃培养箱中水解16~18h. 7.3显色：从培养箱中取出试管冷至室温后加0.2ml5%对二甲胺基苯甲醛，摇匀；加0.2ml1%硝 酸钠，摇匀；将试管置于冰水中，再加5ml浓盐酸.取出试管，强烈振摇后置于40C培养箱中显色45min (温度升到40℃时记时). 7.4测定：取出试管冷至室温后，用水稀释至刻度，摇匀.以4000r/min离心10min.取上清液以试 剂空白作对照，在590nm波长处测读吸光度. ...
NY/T 57-1987 谷物籽粒色氨酸测定法.pdf
