SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3306.14-2017 国境口岸环介导恒温扩增(LAMP) 检测方法 第14部分：大肠杆菌0157：H7 Loop-mediated isothermal amplification detection method at frontier port- Part 14:Escherichia coli 0157:H7 2017-05-12发布 2017-12-01实施 中华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3306.14-2017 前言 SN/T3306《国境口岸环介导恒温扩增(LAMP)检测方法》分为14个部分： —第1部分：鼠疫杆菌； 第2部分：产毒素霍乱弧菌； —第3部分：志贺氏菌； 第4部分：嗜肺军团菌； 第5部分：布鲁氏菌； 第6部分：黄热病毒； 第7部分：猴痘病毒； 第8部分：基孔肯雅病毒； 第9部分：结核分枝杆菌； —第10部分：炭疽芽孢杆菌； 第11部分：副溶血性弧菌； 第12部分：空肠弯曲菌； —第13部分：疟原虫； —第14部分：大肠杆菌O157:H7. 本部分为SN/T3306的第14部分. 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本部分起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局. 本部分主要起草人：祁军、詹曦菁、滑娜、赵欣、左锋. I SN/T3306.14-2017 国境口岸环介导恒温扩增(LAMP) 检测方法 第14部分：大肠杆菌0157：H7 1范围 SN/T3306的本部分规定了在国境口岸利用环介导恒温核酸扩增(LAMP)法检测大肠杆菌0157： H7的检测对象、检测程序及检测结果的报告. 本部分适用于国境口岸大肠杆菌0157：H7菌株的筛选检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB4789.36食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 WS271感染性腹泻诊断标准 人间传染的病原微生物名录（卫科教发(2006）15号) 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid) dNTP:脱氧核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate) EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetie acid) LAMP:环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification) Triton X-100:聚乙二醇辛基苯基醚 4生物安全及防污染措施 实验生物安全要求、操作及处理按照GB19489和《人间传染的病原微生物名录》的规定执行，由通 过生物安全培训并具备资质的工作人员进行.防止污染措施应符合WS/T230的规定. 5技术概要 根据大肠杆菌O157:H7rfbE基因序列设计特异性内外引物及环状引物各一对，共三对引物，特异 性识别靶序列上的rfbE基因，利用Bst酶启动循环链置换反应，在特异性基因序列启动互补链合成，在 1 ...
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