SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4827-2017 蛙脑膜炎败血金黄杆菌病检疫技术规范 Quarantine protocol for Chryseobacterium meningosepticum of frog 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T4827-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检 疫局. 本标准主要起草人：徐淑菲、孔繁德、谢明星、唐泰山、王凯民、姜焱. SN/T4827-2017 蛙脑膜炎败血金黄杆菌病检疫技术规范 1范围 本标准规定了用于蛙脑膜炎败血金黄杆菌病的临床症状及细菌学、PCR等实验室诊断、检测方法. 本标准适用于蛙脑膜炎败血金黄杆菌病的流行病学调查、监测、诊断和出入境检验检疫. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T18088出入境动物检疫采样 3试剂和培养基 除另有规定外，以下所用生化试剂均为分析纯.正文中试剂配制方法见附录A. 3.1营养肉汤. 3.2胰蛋白胨大豆琼脂(TSA). 3.3硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂(TCBS). 3.4营养琼脂. 3.5生化鉴定试剂盒. 3.6革兰氏染色液. 3.7DNA提取试剂：蛋白酶K、SDS、酚-氯仿抽提法所需要的相关试剂；商品化的DNA提取试剂盒. 3.8PCR试剂：10X浓缩缓冲液、dNTP、氯化镁、6X电泳上样缓冲液、琼脂糖、5X电泳缓冲液(TBE) 等，均为商品化试剂盒中成分. 3.9引物： a)特异性引物： —P1:5'-GATTCGTCGGATTATATTG-3'; —P2:5’-CCACTTCAACCTTACTCAAGACTAAC-3'. 浓度为10μmol/L 扩增产物大小为475bp~479bp. b)通用引物： —P3:5’-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'; —P4:5’-GGYTACCTTGTTACGACTT-3’. 浓度为10μmol/L 扩增产物大小为1488bp. 3.10阴性和阳性对照：由国家质检总局指定实验室提供. 3.11 DNA DL2000 Marker:适合检测分子量大小100bp~2000bp间的DNA片段，一20℃保存. 4疾病概述 蛙脑膜炎败血金黄杆菌病，是由脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabethkingia meningoseptica)引起 1 ...
SN/T 4827-2017 蛙脑膜炎败血金黄杆菌病检疫技术规范.pdf
