SN/T 5105-2019 国境口岸轮状病毒(B组)实时荧光RT-PCR检测方法.pdf

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ICS11.020 C62 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5105-2019 国境口岸轮状病毒(B组)实时荧光 RT-PCR检测方法 Detection method of Rotavirus(group B)by real-time fluorescence RT-PCR at frontier ports 行业标准信息服务平台 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5105-2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国拱北海关、中华人民共和国厦门海关、中华人民共和国深圳海关、 深圳市计量质量检测研究院. 本标准主要起草人:莫秋华、杨坤宇、杨泽、汪海波、史蕾、陈晶、陈新彬、吴锦顺、涂承宁、史咏梅、 杨国武. 行业标准信息服务平台 SN/T5105-2019 国境口岸轮状病毒(B组)实时荧光 RT-PCR检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸成人腹泻轮状病毒(B组)实时荧光RT-PCR检测的对象、检测方法及结果 报告. 本标准适用于国境口岸成人腹泻轮状病毒(B组)的实验室检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T1720出入境口岸轮状病毒感染监测规程 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 人间传染的病原微生物名录(原中华人民共和国卫生部) 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件, 3.1 轮状病毒rotavirus 属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)轮状病毒属(Rotavirus) 为双链RNA病毒,基因组分1l个节段, 是引起人类、哺乳动物类和鸟类腹泻的主要病原体.轮状病毒有7个血清组(A~G) 其中A、B、C组能 引起人和动物腹泻.A组轮状病毒最常见,它是婴幼儿腹泻首要的致病原.组轮状病毒感染对象没 有年龄限制,主要感染15一45岁的青壮年,但也可感染老人和婴幼儿,故又定名为成人腹泻轮状病毒 (adult diarrhea rotavirus ADRV). 3.2 逆转录聚合酶链反应reverse transcription polymerase chain reaction;RT-PCR 0Z 将RNA的逆转录(RT)和CDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术.本标准采用一步法逆 转录聚合酶链式反应(RT-PCR).在一步法RT-PCR中,首先以RNA为模板,利用下游特异性引物, 在依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)的作用下转录合成互补DNA(cDNA) 该步称作“逆转录”:随 后,再以cDNA为模板,利用上游和下游特异性引物,在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增;最 终使RNA分子的某个特定区域(目的片段)被扩增达几百万倍. 3.3 实时荧光RT-PCR real-time fluorescence RT-PCR 通过荧光染料或荧光标记的特异性荧光探针,对反转录后PCR扩增的产物进行标记跟踪,利用荧 光信号累积实现实时在线监测整个PCR反应过程,结合相应的软件可以对结果进行定性和定量分析. ...

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