ICS11.100 C62 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5109-2019 国境口岸鼠疫耶尔森菌聚合酶螺旋 恒温扩增检测方法 Polymerase spiral isothermal reaction methodfor Yersinia pestis at frontier ports 行业标准信息服务平台 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5109-2019 前言 本标准根据GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国满洲里海关、中华人民共和国福州海 关、中国人民解放军疾病预防控制研究所. 本标准主要起草人：张晓龙、高艳菲、郭文秀、王静、黄恩炯、刘威、慈颖、刘丽娟、杨宇、黄留玉. 行业标准信息服务平台 SN/T5109-2019 国境口岸鼠疫耶尔森菌聚合酶螺旋 恒温扩增检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸检测鼠疫耶尔森菌聚合酶螺旋恒温扩增(PSR)法，包括样本前处理、检测程 序、方法、结果判定及报告. 本标准适用于国境口岸鼠疫耶尔森菌疑似感染样本、啮齿动物、蚤等样本中鼠疫耶尔森菌的筛选 检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB19489实验室生物安全通用要求 WS233微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 人间传染的病原微生物名录（中华人民共和国卫生部） 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 鼠疫耶尔森菌Yersinia pestis 业标 分类上属原生生物界，原核细胞型微生物，革兰氏阴性兼性厌氧菌类，肠杆菌科，耶尔森菌属，假结 核耶尔森菌鼠疫亚种(Y.pseudotuberculosis pestis).鼠疫的病原菌，能够引发腺鼠疫、败血型鼠疫和 肺鼠疫，是生物战剂和生物恐怖的重要病原菌之一.F1抗原是目前公认的鼠疫菌种特异性抗原之一 其F1基因常作为鼠疫菌核酸检测的靶标. 3.2 多 聚合酶螺旋恒温扩增反应polymerase spiral isothermal reaction(PSR) 一种核酸恒温扩增方法，利用2条~4条引物来特异性识别目标片段的4个~6个独立区域，在 Bst DNA聚合酶的链置换作用下，短时内扩增靶序列，形成螺旋扩增.大量合成目标DNA的同时，伴 随有pH的大幅下降，加人pH指示剂，可通过观察颜色变化判定结果；也可以加入荧光染料（例如： EveGreen) 通过荧光PCR仪上的扩增曲线和溶解曲线来判定结果. 4缩略语 下列缩略语适用于本文件. PSR:聚合酶螺旋恒温扩增反应(polymerase spiral isothermal reaction) 1 ...
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