ICS65.020.30 B41 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5110-2019 仙台病毒病检疫技术规范 Quarantine protocol for Sendai virus infectious disease 行业标准信息服务平台 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5110-2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国上海海关、中华人民共和国广州海关. 本标准主要起草人:蒋静、王艳、宋青、田纯见、黄忠荣、李健、王巧全、林颖峥、张强、熊炜. 行业标准信息服务平台 SN/T5110-2019 仙台病毒病检疫技术规范 1范围 本标准规定了鼠仙台病毒病RT-PCR检测、Real-time RT-PCR检测、免疫荧光试验、血凝抑制试 验的操作方法. 本标准适用于鼠仙台病毒病的流行病学调查、诊断、检疫和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本 文件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3临床诊断 鼠感染仙台病毒病临床上主要有两种不同的感染类型,可据此进行初步诊断: 慢性型:呈地方性流行,病毒在鼠群中长期存在.多见于断乳后不久的至42d的小鼠,通常为亚临 床感染,病毒存活14d左右. 急性型:常表现临床症状,在较短的时间内自愈或者转为地方流行.病鼠常表现为被毛粗乱,弓背, 呼吸困难,眼角有分泌物,发育不良消瘦等症状,怀孕母鼠妊娠期延长,新生乳鼠死亡率增加. 大体解剖观察:主要病变出现于呼吸道和局部淋巴结,肺呈杨梅色,切开时有泡沫状血样液体流出. 病交多见于尖叶,膈叶和心叶.、 组织病理学观察:分为三个阶段,急性阶段表现为炎症反应和靶细胞溶解;修复阶段表现为再生的 靶细胞上皮增生;恢复阶段表现为实质癍痕化收缩 4采样和样品前处理 准信息 采集病鼠口鼻液、血液、粪便,以及肝、脾、肺、肾等组织器官.粪便或组织样品加等体积生理盐水 (附录A.1)研磨匀浆,3 000g离心15min 收集上清液待检.口鼻腔拭子、粪拭子用1mL生理盐水浸 润后,取上清液待检.取鼠尾静脉血或动脉血,室温静置30min 1 000g离心10min 取上清作为待检 血清样品. 5RNA抽提及cDNA模板制备 5.1试剂与设备 除特别说明外,实验用水应符合GB/T6682要求. 5.1.1 Trizol试剂:4℃保存. 5.1.2氯仿、丙酮:常温保存. 5.1.3异丙醇:使用前预冷至一20℃. 1 ...