ICS01.040.67 X04 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5223—2019 蜂蜜中18种游离氨基酸的测定 高效液相色谱-荧光检测法 Determination of 18 free amino acids in honey- HPLC-FLD method 2019-12-27发布 2020-07-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5223-2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院. 本标准主要起草人:陈辉、彭涛、代汉慧、胡雪艳、谢瑜杰、范春林. I SN/T5223-2019 蜂蜜中18种游离氨基酸的测定高效液相色谱-荧光检测法 1范围 本标准规定了蜂蜜中18种游离氨基酸的高效液相色谱-荧光检测方法. 本标准适用于蜂蜜天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、谷氨酰胺(Gln)、组氨酸 (His)、甘氨酸(Gly)、苏氨酸(Thr)、精氨酸(Arg)、丙氨酸(Ala)、酪氨酸(Tys)、缬氨酸(Val)、 蛋氨酸(Met)、色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ileu)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)、 脯氨酸(Po)的测定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法. 3方法提要 采用定量环衍生的方法对蜂蜜中氨基酸进行衍生化处理,再用高效液相色谱-荧光检测法进行 测定,外标法定量. 4 试剂和材料 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水. 4.1 磷酸二氢钠(NaH PO42H O) 4.2二 氢氧化钠(NaOH). 4.3 硼酸(BH O3). 4.4 乙晴(色谱纯) 4.5 甲醇(色谱纯). 4.6 厂浓盐酸. 4.7 邻二甲醛试剂(0PA):10mg/mL 4.8 9-甲基氯甲酸酯试剂(FM0C):2.5mg/mLo 4.9 氢氧化钠溶液(10mol/L):称取40g氢氧化钠(4.2),溶于50mL水中,冷却至室温后,用水 稀释至100mL 混匀. 4.10 0.1mol/L盐酸溶液:取0.90mL浓盐酸(4.6)至100mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀. 4.11 硼酸盐缓冲液:称取2.47g硼酸(4.3)于100mL水中,用氢氧化钠溶液(4.9)调节H值至10.2. 4.12 磷酸二氢钠缓冲溶液:称取6.24g磷酸二氢钠(4.1),转移到1000mL玻璃烧杯中.加人1000mL 超纯水,搅拌,直到晶体完全溶解.用氢氧化钠溶液(4.9)调节溶液H值至7.80. 4.1318种单个氨基酸标准品(具体名称参见附录A):固体,纯度不小于98%. 4.14混合氨基酸标准储备溶液:准确称取一定量的各种氨基酸标准品,用0.1mol/L盐酸溶液(4.10) 1 ...