SN/T 5225-2019 进出口食品中五种致泻大肠埃希氏菌快速检测方法 多重PCR法.pdf

ICS W SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5225—2019 进出口食品中五种致泻大肠埃希氏菌快 速检测方法多重PCR法 Multiplex PCR for rapid identification of diarrheogenic Escherichia coli in food Multiplex PCR method 2019-12-27发布 2020-07-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5225—2019 前言 本标准依照GB/T1.1一2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的规则起草. 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国郑州海关、解放军疾病预防控制中心、中国动物卫生与流行 病学中心、中华人民共和国拱北海关、中华人民共和国福州海关. 本标准主要起草人：苗丽、王永亮、张灿、李阳、王俊杰、张秀平、党志浩、李轲、冯家旺、 郑晶. I SN/T5225—2019 进出口食品中五种致泻大肠埃希氏菌快速检测方法多重PCR法 1范围 本标准规定了进出口食品中肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC) 肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC 又称产志贺毒素大肠埃希氏菌)，肠产毒性大肠埃希氏菌(ETEC) 肠侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC) 肠集聚性大肠埃希氏菌(EAEC)五种致泻大肠埃希氏菌快速检测方法. 本标准适用于各种进出口食品及其原料，有专门规定检验方法的除外.其它产品可参考使用本 标准. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本标准. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1多重聚合酶链式反应(MPCR)Multiplex Polymerase Chain Reaction 又称多重引物PCR或复合PCR 它是在同一PCR反应体系里加上两对以上引物，同时扩增出多 个核酸片段的PCR反应，其反应原理是模板基因序列先经高温变性成为单链，在DNA聚合酶作用和 适宜的反应条件下，根据模板序列设计的两条引物分别与模板DA两条链上相应的一段互补序列发 生退火而相互结合，接着在DNA聚合酶的作用下以四种脱氧核糖核酸(dNTP)为底物，使引物得以 延伸，然后不断重复变性、退火和延伸这一循环，使欲扩增的基因片段以几何倍数扩增. 3.2致泻大肠埃希氏菌Diarrheogenic Escherichia coli 致泻大肠埃希氏菌是一类能引起人体以腹泻症状为主的大肠埃希氏菌，同时也是一种可经过 污染食物引起人类发病的致病菌.根据毒力因子、致病机制、流行病学特征，主要将致泻大肠埃 希氏菌分为5类：肠致病性大肠埃希氏菌(enteropathogenic E.coli EPEC) 肠出血性大肠埃希 氏菌(enterohemorrhagic E.coi EHEC 又称产志贺毒素大肠埃希氏菌)，肠产毒性大肠埃希氏菌 (enteroinvasive E.coli ETEC) 肠侵袭性大肠埃希氏菌(enteroinvasive E.coli EIEC) 肠集聚粘附性 性大肠埃希氏菌(enteroaggregative E.coli EAEC). 4缩略语 下列缩略语适用于本文件. DEC 致泻大肠埃希氏菌Diarrheogeni...