ICS07.100.30 X04 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5228.9-2019 出口食品中病原微生物快速筛选方法 MALDI-TOF MS法 第9部分:铜绿假单胞菌 Rapid detection of pathogens in export food-MALDI-TOF MS method- Part 9:Pseudomonas aeruginosa 2019-12-27发布 2020-07-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5228.9-2019 前言 SN/TXXXX《出口食品中病原微生物快速筛选方法MALDI-TOF MS法》分为九个部分: 一—第1部分:溶藻弧菌; ——第2部分:产气英膜梭菌; 一—第3部分:金黄色葡萄球菌; -第4部分:克罗诺杆菌属; 一—第5部分:创伤弧菌; ——第6部分:蜡样芽胞杆菌; ——第7部分:空肠弯曲菌; 一—第8部分:肺炎克雷伯氏菌; 一一第9部分:铜绿假单胞菌. 本部分为SN/TXXXX的第9部分. 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本部分由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本部分起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国伊宁海关、中华人民共和国库尔 勒海关、中华人民共和国吉林海关、中华人民共和国北京海关. 本部分主要起草人:王娉、孟茹、冯新忠、赵晓美、陈颖、蔡阳、曾静. I SN/T5228.9-2019 出口食品中病原微生物快速筛选方法MALDI-TOF MS法 第9部分:铜绿假单胞菌 1范围 SN/T5228的本部分规定了出口食品中铜绿假单胞菌的MALDI-TOF MS快速筛选方法. 本部分适用于出口食品中铜绿假单胞菌的快速筛选. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 化妆品安全技术规范微生物检验方法铜绿假单胞菌检验方法 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. BTS:细菌检测标准品(bacterial test standard)o CHCA:a-氰基-4-羟基肉桂酸(a-eyano-4-hydroxy-cinnamic acid)o MALDI-TOF MS:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry ) 4生物安全措施 为了保护实验室人员的安全,应由具备资格的工作人员检测铜绿假单胞菌,培养物和废弃 物应参照GB19489中的有关规定执行. 5方法提要 MALDI-TOF MS是应用于微生物全细胞快速检测的技术,主要依据微生物特征蛋白指纹图谱分析, 完成微生物的鉴定和分类.将待鉴定的菌落样品与适量的基质溶液点加在样品板上,溶剂挥发后形成 样品与基质的共结晶,利用激光作为能量来源辐射共结晶体,基质分子吸收能量与样品解吸附并使样 品电离,经过飞行时间分析器,将不同质荷比的离子分开,形成微生物特异性的质谱图.将待测微生 物质谱图与已知微生物的标准蛋白指纹图谱数据库进行比较,可以确定微生物的种属,进行微生物种 属鉴定. 6试剂和材料 除有特殊说明外,试剂均使用色谱纯试剂.实验用水符合GB/T6682中一级水的要求. ...