ICS65.020.01 CCS B16 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5334.5—2020 转基因植物产品的数字PCR检测方法 第5部分：转基因棉花 Protocol of digital PCR for quantitatively detecting genetically modified plants and their derived products- Part 5:Genetically Modified Cotton 2020-12-30发布 2021-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5334.5—2020 前言 SN/T5334一2020《转基因植物产品的数字PCR检测方法》分为8个部分： ——第1部分：通用要求及定义； 第2部分：转基因大豆； —第3部分：转基因玉米； 第4部分：转基因油菜； —第5部分：转基因棉花； —第6部分：转基因马铃薯； —第7部分：转基因苜蓿； ——第8部分：转基因甜菜. 本文件为SN/T5334一2020的第5部分. 本文件按照GB/T1.1一2020给出的规则起草. 本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海海关. 本文件主要起草人：李想、黄新新、刘静远、蔡一村、蒋静、左翠花、郭德华、朱雅君、付伟、 何宇平、刘月明、朱鹏宇、黄文胜、朱水芳. SN/T5334.5—2020 转基因植物产品的数字PCR检测方法 第5部分：转基因棉花 1范围 本文件规定了GHB119、T304-40、GHB614、LLCotton.25、MON1445、MON15985-7、MON88913等 7个转基因棉花品系的转化事件特异性数字PCR检测方法. 本文件适用于棉籽、棉籽粕、棉花叶子中上述7个转基因棉花品系的检测.本文件的定量检测下 限为40Pg(约20拷贝)棉花基因组DNA或0.1%(w/w)含量转基因棉花品系成分. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适 用于本文件. SN/T5334.1转基因植物产品的数字PCR检测方法第1部分：通用要求及定义 3术语和定义 SN/T5334.1界定的术语与定义适用于本文件. 4方法原理 见SN/T5334.1 5主要设备及试剂 5.1内源基因和外源基因：内源基因为Adhc基因；外源序列为品系GHB614、MON1445、MON88913 外源基因插入位点5端跨边界序列，品系GHB119、T304-40、LLCotton25、MON15985-7外源基因插入 位点3’端跨边界序列.引物及探针序列参见附录A. 5.2其他设备及试剂要求见SN/T5334.1的规定. 6方法操作步骤 6.1一般性操作步骤 一般性操作步骤按照SN/T5334.1的规定执行. 6.2数字PCR反应体系配制 按表1将各组分加入洁净离心管中，充分混匀.PCR体系配制及转移时尽量避免产生气泡.每 个测试样和质控样品的Adhe基因及转化体特异性序列的数字PCR应设置至少3个平行重复. 1 ...
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