ICS65.020.01 CCS B16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3859-2021 果品中交链孢霉菌鉴定 技术规程 Technical code of practice for identification of Alternaria Nees in fruits 2021-05-07发布 2021-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3859—2021 全国业食品标准 共服务平台 典通 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化作导则 第1部分：标化食熟和起草规期的规定 起草. 本文件由农业农村部种植业管理司提出. 本文件由全国果品标准化技术委员会(SAC/TC510)归口. 本文件起草单位：北京农业质量标准与检测技术研究中心、中国科学院植物研究所. 本文件主要起草人：姜冬梅、李博强、冯晓元、王蒙、王刘庆、郭晓军、韩平. I NY/T3859—2021 果品中交链孢霉菌鉴定技术规程 1范围 本文件规定了鲜食果品中交链孢霉菌(Alternaria Nees)的鉴定方法，包括分子生物学法（第一法）和 形态学法（第二法）. 本文件适用于鲜食果品中交链孢霉菌的鉴定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注母 期 引用集纸服本（包的修改单）适用于本 文件. H GB4789.16食品安全国家标 品微生物学：检验常见 鲁南的形态学鉴定 GB/T6682分析实验室水规格和试验方法 C GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T27403实验室质量控制规范/食品分子生物学检测 0 3术语和定义 下列术语和定义适门于本文件 3.1 RESEARC 聚合酶链式反应 -polymerase chain reaction PCR 一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术.模板)NA序列经高温变性为单链，适宜的 反应条件下，根据模板序列设计的两条物分别与两条模极DA单链上相应的互补序列配对结合，在 DNA聚合酶的作用下，以四种脱氧核糖核一磷酸GNTP为反应原料，按减补配对与半保留复制 原理，合成一条新的与模板A链互补的半保留复制链然后不断重复变性、退火和延伸这一循环，使日 的DNA片段以几何倍数扩增. 3.2 GenBank数据库GenBank Database 美国国家生物技木信息中心(National Center for Biotechnology Informatiou NCB)建立的DNA序 列数据库. 4防污染措施 4.1鉴定过程中防污染措施按GB19489、GB/T27403中的规定执行. 4.2鉴定过程中的含菌废弃物需经121℃高压火菌处理30min后再弃置. 第一法分子生物学法 5原理 采用聚合酶链式反应(PCR)扩增样品中真菌核糖体基因内转录间隔区(ITS)序列，并对PCR产物进 行序列测定，将测序结果与GenBank数据库中的相关序列进行比对，确定样品中是否存在交链孢霉菌. 6主要试剂 6.1DNA提取溶液（见附录A中的A.1). 1 ...
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