ICS65.020.99 B16 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1135.10-2013 马铃薯V病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of potato virus V 2013-08-30发布 2014-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 制涂层查真伪 SN/T1135.10-2013 前言 SN/T1135共分为10部分: ——第1部分:马铃薯癌肿病检疫鉴定方法; ——第2部分:马铃薯黄化矮缩病毒检疫鉴定方法; ——第3部分:马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法; ——第4部分:马铃薯黑粉病菌检疫鉴定方法; ——第5部分:马铃薯环腐病菌检疫鉴定方法; —第6部分:马铃薯绯腐病菌检疫鉴定方法; —第7部分:马铃薯A病毒检疫鉴定方法; ——第8部分:马铃薯坏疽病菌检疫鉴定方法; ——第9部分:马铃薯青枯病菌检疫鉴定方法; ——第10部分:马铃薯V病毒检疫鉴定方法. 本部分为SN/T1135的第10部分. 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共 和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国烟台出入境检验检疫局、中华人民共和国黑龙江出入境检 验检疫局、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局. 本标准主要起草人:李彬、闻伟刚、粟智平、田永蕾、吴翠萍、粟寒、刘洪义、王秀芬、李明福. I SN/T1135.10-2013 马铃薯V病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了马铃薯V病毒检疫鉴定的基本原则和方法. 本标准适用于进出境种薯、商品用薯、组培苗和脱毒苗等马铃薯种质和番茄等茄科作物中可能 带有马铃薯V病毒的检疫鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. SN/T1840植物病毒免疫电镜检测方法 3原理 3.1马铃薯V病毒学名与分类地位 学名:Potato virus V 缩写:PVV 分类地位:马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Pol yuirus). 3.2检疫鉴定依据 马铃薯V病毒的血清学特性、分子生物学特性和病毒粒体形态是检疫鉴定的主要依据. 该病毒的相关资料参见附录A 4仪器设备、用具及试剂 4.1主要仪器设备 酶联检测仪、洗板机、高速冷冻台式离心机、PCR仪、荧光定量PCR仪、电泳仪,水平电泳槽,凝胶 成像仪、水浴槽、透射电子显微镜、天平(感量:0.001g)等. 4.2主要用具 研钵和研棒、各种量程的可调移液器(2μL 10μL 20μL 100μL 200μL 1000μL)、各种吸头 (10pL 200μL 1000μL)、96孔酶标板、离心管(0.2mL 0.6mL 1.5mL)等. 4.3主要试剂 主要酶联测定试剂见附录B 反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测试剂见附录C 实时荧光RT- PCR检测试剂见附录D 生物学测定试剂参见附录E. 1 ...