SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1135.7-2009 马铃薯A病毒检疫鉴定方法 Quarantine identification of Potato virus A 2009-09-02发布 2010-03-16实施 中华人民共和国 防伪 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T1135.7-2009 前言 本标准的附录B、附录C、附录D为规范性附录,附录A为资料性附录. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准由中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院负责起草. 本标准主要起草人:王秀芬、李明福、刘伟、高志方、刘善斌、周铭. 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准. SN/T1135.7-2009 马铃薯A病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了进境植物检疫中对马铃薯A病毒的检疫鉴定方法. 本标准适用于进境种薯、商品用薯、组培苗和脱毒苗等马铃薯种质中马铃薯A病毒的检疫 鉴定. 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件,其随后 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准. SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样 3原理 3.1学名与分类地位 学名:Potato virus A 缩写:PVA 分类地位:马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒网(Potyvirus). 3.2检疫鉴定依据 马铃薯A病毒的血清学特性分子生物学特性和生物学特性是检疫鉴定的主要依据. 其他资料参见附录A. 4仪器设备、用具及试剂 4.1仪器设备 酶联检测仪、天平(感量,1/10000g)、PH计、微量榨汁瓶、PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、 隔离温室、恒温水浴、低温冰箱等 微量移液器(2rL 10L 20ui 100uL 200aL 1000uL)、酶联板、研钵、eppendorf管、花盆、消毒 土等. 4.2试剂 酶联免疫吸附测定试剂(见附录B)、RT-PCR检测试剂(见附录C). 5样品制备 抽样按照SN/T2122的规定执行. 将马铃薯块茎种植在隔离温室中,于25℃生长并进行症状观察.待长出3片~4片叶后将表现症 状的植株编号,未表现症状的植株分组(10株为]组)并编号.采集的叶片进行酶联免疫测定、RT-PCR 检测或生物学测定. 6检测方法 6.1酶联免疫吸附测定 见附录B. ...