SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1151.5—2014 代替SN/T1151.5一2003 对虾杆状病毒病检疫技术规范 Quarantine protocol for tetrahedral baculovirosis 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1151.5-2014 前 言 SN/T1151分为6部分: 一虾桃拉综合征检疫技术规范; —对虾白斑病检疫技术规范; 一斑节对虾杆状病毒(MBV)诊断方法; —虾黄头病检疫技术规范; —对虾杆状病毒病检疫技术规范; ——对虾白斑病毒斑点杂交和原位杂交检测操作规程. 本部分为SN/T1151的第5部分. 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本部分代替SN/T1151.5一2003《对虾杆状病毒(BP)检测方法》. 本部分与SN/T1151.5一2003相比,主要技术变化如下: —一增加了采样; 一一一对PCR试验引物进行了修改; —增加了扩增产物的参考序列. 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本部分起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民 共和国山东出入境检验检疫局. 本部分主要起草人:史秀杰、何俊强、蒋玉婷、王津津、于力、郑晓聪、贾鹏、兰文升、杨锦舜、刘荭. 本部分所代替标准的历次版本发布情况为: —SN/T1151.5-2003. I SN/T1151.5-2014 对虾杆状病毒病检疫技术规范 1范围 SN/T1151的本标准规定了对虾杆状病毒的显微镜检查、聚合酶链式反应检测方法. 本标准适用于对虾杆状病毒病的流行病学调查、诊断、检疫和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出人境动物检疫采样 GB19489实验室生物安全通用要求 3试剂和材料 3.1水:符合GB/T6682一级水的规格. 3.2 Tag DNA聚合酶:一20℃保存,不要反复冻融或温度剧烈变化. 3.3 dNTPs:含dCTP、dGTP、dATP、dTTP各10mmol/L. 3.4引物:一对引物,浓度为40μmol/L 序列为: 6581F:5’-TGT-AGC-AGC-AGA-GAA-GAG-3’ 6582R:5’-CAC-TAA-GCC-TAT-CTC-CAG-3’ 扩增病毒基因中的645bp的DNA片断. 3.5无水乙醇:分析纯,使用前预冷到一20℃. 4仪器和设备 4.1剪刀和镊子. 4.2载玻片和盖玻片. 4.3恒温培养箱. 4.4普通冰箱和超低温冰箱. 4.5正置显微镜. 4.6离心机和离心管. 4.7微量移液器及吸头. 4.8PCR扩增仪. 4.9电泳仪. 4.10紫外观察灯或凝胶成像仪. 1 ...