SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1558-2017 代替SN/T1558-2005 禽脑脊髓炎检疫技术规范 Quarantine protocol for avain encephalomyelitis 2017-05-12发布 2017-12-01实施 中华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1558-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准代替SN/T1558一2005《禽脑脊髓炎琼脂免疫扩散试验操作规程》. 本标准与SN/T1558一2005相比,主要技术变化如下: —一增加了禽脑脊髓炎病毒分离; ——增加了反转录聚合酶链式反应; ——增加了间接免疫荧光试验; ——增加了酶联免疫吸附试验. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院. 本标准主要起草人:杨俊兴、孙洁、廖立珊、张彩虹、刘建利、陶虹、林彦星、吕建强、曹琛福、卢体康、 花群义、秦智锋. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为: —SN/T1558—2005. SN/T1558-2017 禽脑脊髓炎检疫技术规范 1范围 本标准规定了禽脑脊髓炎的病毒分离与鉴定、反转录聚合酶链式反应、间接免疫荧光试验、酶联免 疫吸附试验、琼脂扩散试验的检测技术. 本标准适用于禽脑脊髓炎的检疫. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. SN/T2123出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. AE:禽脑脊髓炎(参见附录A)(Avian encephalomyelitis) AEV:禽脑脊髓炎病毒(Avian encephalomyelitis virus) AGID:琼脂扩散试验(Agar gel immunodiffusion test) BSA:牛血清白蛋白(Bovine serum albumin) CEF:鸡胚成纤维细胞(Chickenembryo fibroblast) ELISA:酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay) PBS:磷酸缓冲液(Phosphate buffer saline) RT-PCR:反转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-Polymerase chain reaction) 4病毒分离与鉴定 4.1设备、器材和试剂 4.1.1主要设备和器材:高压灭菌锅、冰箱、生物安全柜、离心机、无菌剪刀、镊子、平皿、烧杯、玻璃瓶、 组织研磨器、注射器等. 4.1.2材料:SPF种蛋、SPF雏鸡. 4.1.3主要试剂:生理盐水、青霉素(10000IU/mL)、链霉素(10000μg/mL). 4.2样品的采集、保存和运输 无菌取雏鸡脑组织后,宜立即处理(见4.3),若暂时不能处理,可于一70℃冰箱中保存.样品的保 存和运送按SN/T2123进行操作. 4.3样品的处理 将组织样品无菌称量、研磨,反复冻融3次,用无菌生理盐水溶液作1:5(W/V)稀释制成悬液,并 1 ...
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