SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1612-2013 代替SN/T1612一2005 香石竹环斑病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Carnation ringspot virus 2013-11-06发布 2014-06-01实施 30 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 刮除层查真仿 SN/T1612-2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准代替SN/T1612一2005《香石竹环斑病毒血清学检测方法》. 本标准与SN/T1612一2005相比，主要技术变化如下： ——增加了免疫捕获RT-PCR检测方法； ——增加了免疫电镜检测方法； —增加了实时荧光RT-PCR检测方法； ——增加了香石竹环斑病毒相关资料的附录. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准由中华人民共和国上海出入境检验检疫局负责起草. 本标准主要起草人：杨翠云、于翠、胡培龙、陶廷典、崔学慧、于子翔. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： —SN/T1612-2005. I SN/T1612-2013 香石竹环斑病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准主要规定了进境种苗中香石竹环斑病毒的DAS-ELISA、免疫电镜、免疫捕获RT-PCR和实 时荧光RT-PCR等检疫鉴定方法. 本标准适用于进境种苗中香石竹环斑病毒的检疫鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. SN/T1840植物病毒免疫电镜检测方法 3香石竹环斑病毒基本信息 中文名：香石竹环斑病毒 英文名：Carnation ringspot virus 缩写：CRSV 分类地位：番茄丛矮病毒科(Tombusviridae) 香石竹环斑病毒属(Dianthovirus) 传播途径：该病毒通过无性繁殖材料的运输进行长距离传播，近距离主要是由于植物间的接触、土 壤污染和农事操作等引起病毒传播. 香石竹环斑病毒的其他信息参见附录A. 4方法原理 香石竹环斑病毒具有中等到强的免疫原性，易获得高质量的多抗血清，属内病毒之间有较弱的血清 学交叉反应. 以香石竹环斑病毒的抗血清，采用DAS-ELISA或者免疫捕获RT-PCR进行病毒初筛，如果样品阳 性，则采用实时荧光RT-PCR、免疫电镜或者鉴别寄主反应，对阳性材料进行验证.两种及以上方法可 进行病毒种类的检疫鉴定. 5仪器设备、用具和试剂 5.1仪器设备 酶标仪、PCR仪、实时荧光PCR仪、超净工作台、电子天平(1/10000g)、电泳仪、电泳槽、凝胶成像 系统、水浴锅、高速冷冻离心机、一80℃超低温冰箱、高压灭菌锅、制冰机、微波炉、旋涡振荡器. 5.2用具 可调式微量移液器(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL、5000μL)及相应的无RNase吸头、无 1 ...
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