SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1617—2017 代替SN/T16172005 可可肿枝病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Cacao swollen shoot virus 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1617-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准代替SN/T1617一2005《可可肿枝病毒检测方法》,与SN/T1617一2005相比,主要技术变 化如下: 一完善了原标准的检测方法,增加实时荧光PCR检测方法; ——完善了原标准的基因组内容; 一删除了原标准中的免疫诱捕PCR方法,增加了PCR方法; —一修改了原标准中结果判断; ——修改了原标准中附录. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国中山出入境检验检疫局、中华人民共 和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局. 本标准主要起草人:魏梅生、陈定虎、相宁、李桂芬、吴翠萍、郭京泽. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为: —SN/T1617—2005. SN/T1617-2017 可可肿枝病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了可可肿枝病毒的检测方法. 本标准适用于进境植物材料中可可肿枝病毒的检疫检测. 2可可肿枝病毒基本信息 学名:Cacao swollen shootvirus 缩写:CSSV 中文名:可可肿枝病毒 异名:Theobroma virus 1;Marmor theobromae;Theobromavirus inflans. 分类地位:花椰菜花叶病毒科(Caulimoviridae);杆菌状DNA病毒属(Badnavirus). CSSV的其他信息参见附录A. 3方法原理 CSSV的蛋白和基因组特征是该病毒检疫鉴定的依据.根据CSSV与抗体之间的特异性反应,对 植物样品进行双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DAS-ELISA);依据CSSV的基因组特征建立PCR、实时 荧光PCR;通过这些方法的有效组合,判断样品是否带有CSSV 4仪器、用具及试剂 4.1仪器设备 酶联检测仪、天平(感量0.OO1g)、PCR仪、电泳仪、实时荧光PCR仪、电泳槽、紫外透射仪、隔离温 室、榨汁机、水浴锅等. 4.2用具 可调移液器(200μL、20μL、2μL)、可调移液器头、酶联板、离心管、指型管、研钵等. 4.3试剂 酶联测定试剂(见附录B)、聚合酶链式反应检测试剂(见附录C). 5检测方法 5.1双抗体夹心酶联免疫吸附测定 见附录B. ...