SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1618-2017 代替SN/T1618一2005 李属坏死环斑病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Prunus necrotic ringspot virus 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中，华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1618-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准代替SN/T1618一2005《李属坏死环斑病毒检测方法》. 本标准与SN/T1618一2005相比，主要技术变化如下： 一增加了实时荧光RT-PCR检测方法. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准负责起草单位：中国检验检疫科学研究院. 本标准主要起草人：李桂芬、魏梅生、张永江、马洁、孔君. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： —SN/T1618-2005. SN/T1618-2017 李属坏死环斑病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了植物检疫中李属坏死环斑病毒检疫鉴定方法. 本标准适用于植物材料中李属坏死环斑病毒的检疫鉴定. 2基本信息 学名：Prunus necrotic ringspot virus 缩写：PNRSV 分类地位：雀麦花叶病毒科(Bromovirus) 等轴不稳环斑病毒属(Ilarvirus). 该病毒的其他信息参见附录A. 3方法原理 根据李属坏死环斑病毒与抗体之间的特异性反应，对植物样品进行ELISA检测；根据该病毒核酸 序列进行PCR特异性检测，通过电泳条带大小进行结果判定；根据该病毒核酸序列设计特异性引物和 荧光探针，通过检测荧光信号进行结果判定. 4仪器设备及试剂 4.1仪器设备 酶标仪、天平（感量，1/10000g)、PH计、PCR仪、实时荧光PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系 统、隔离温室、恒温水浴低温冰箱等. 微量移液器(2μL、10μL、20μL、100L、200μL、1000μL)、酶联板、研钵、离心管、花盆、消毒土等. 4.2试剂 酶联免疫吸附测定试剂见附录B中B.1 RT-PCR检测试剂见附录C中C.1 实时荧光RT-PCR检 测试剂见附录D中D.1. 5样品制备 木本寄主植物选其幼叶、果肉组织和花，草本植物选其叶子.有症状的样品编号单独检测，没有症 状的样品分组(10~15为1组)并编号检测. 6检测方法 6.1酶联免疫吸附测定 见附录B. ...
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