SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1699—2017 代替SN/T1699.1-2006 SN/T1699.22006 SN/T1699.3-2006 猪流行性腹泻检疫技术规范 Quarantine protocol for pofcine epidemic diarrhea 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T1699-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准代替SN/T1699.1一2006《猪流行性腹泻微量血清中和试验操作规程》、SN/T1699.2一2006 《猪流行性腹泻病毒直接免疫荧光试验操作规程》、SN/T1699.3一2006《猪流行性腹泻间接斑点酶联免 疫吸附试验操作规程》. 本标准与SN/T1699.1一2006、SN/T1699.2一2006、SN/T1699.3一2006相比,主要技术变化 如下: —一增加了猪流行性腹泻病毒分离鉴定方法; ——增加了反转录聚合酶链式反应方法; ——增加了实时荧光反转录聚合酶链式反应方法; ——增加了酶联免疫吸附试验方法,取代间接斑点酶联免疫吸附试验操作规程; —修改了直接免疫荧光试验操作规程,采纳NY/T544一2015《猪流行性腹泻诊断技术》中6.2 “直接免疫荧光法”,并对其操作步骤进行细化描述; ——修改了微量血清中和试验操作规程,对推荐采用的细胞系、病毒增殖与毒价测定、对照设置等 内容进行了修改和补充. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国广东出入境检验检疫局、华南农业大学、中华人民共和国深圳出 入境检验检疫局. 本标准主要起草人:陈茹、马保华、马静云、艾青、朱道中、程珏益、秦智锋、杨俊兴、杨健、刘志玲、 伍绮文、罗琼、段燕喻、孙洁、林志雄、陈兵、王莹、鱼海琼. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为: —SN/T1699.1-2006; —SN/T1699.2—2006; —SN/T1699.3-2006. SN/T1699-2017 猪流行性腹泻检疫技术规范 1范围 本标准规定了猪流行性腹泻的病毒分离鉴定、反转录聚合酶链式反应、实时荧光反转录聚合酶链式 反应、直接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验和微量血清中和试验的实验室检疫技术规范. 本标准适用于进出境猪中猪流行性腹泻的检疫、疫情监测和诊断 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. PED:猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea) PEDV:猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus) PBS:磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline Vero:非洲绿猴肾细胞 DMEM:一种改良细胞培养液(dulbecco’s modified eagle medium CPE:致细胞病变效应(cytopathic effect) RT-PCR:反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction) ddH2O:双蒸水(double distilled water) DEPC:焦碳酸二乙酯(diethy pyrocarbon...