SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1820-2006 2uv71423 隐地疫霉菌检疫鉴定方法 Identification of Phytophthora cryptogea Pethybridge &Lafferty 2006-11-10发布 2007-05-16实施 0 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 数码防伪 SN/T1820-2006 前言 本标准的附录A、附录B、附录C、附录D均为资料性附录. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局. 本标准主要起草人：谭群英、廖力、喻国泉、陈其文、张卫东. 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准. I SN/T1820-2006 隐地疫霉菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了进出境植物检疫中隐地疫霉菌的检疫和鉴定方法. 本标准适用于进出境植物及介质土中隐地疫霉菌的检疫和鉴定. 2原理 2.1分类地位 隐地疫霉菌(Phytophthora cryptogea Pethybridge&Lafferty)属藻菌界(Chromista) 卵菌门 (Oomycota) 腐霉目(Pythiales) 腐霉科(Pythiaceae) 疫霉属(Phytophthora). 2.2检疫原理 隐地疫霉菌的寄主植物很广，为害上百种经济作物，是非洲菊、翠菊、麝香石竹、圣诞花、番茄等植物 的重要病原菌（参见附录A).主要以抗逆性很强的卵孢子在介质土中及寄主残体内越冬并长期生存， 当田间温度和湿度适宜时，卵孢子打破休眠萌发，产生孢子囊.孢子囊在雨后或灌溉后有积水时，很快 释放出大量游动孢子，最终通过幼根或伤口侵入寄主，可造成根、茎部腐烂，致使植物受侵染后叶片迅速 萎蔫枯死. 2.3鉴定依据 隐地疫霉菌在寄主植物上的症状、病原菌形态学特征、生物学特征是鉴定该菌的依据. 3仪器设备及实验用具 3.1仪器设备 生物显微镜、体视显微镜、高压灭菌器、干热灭菌器、普通天平、分析天平、超净工作台、生物培养箱. 3.2实验用具 酒精灯、医用手术剪、镊子、烧杯、培养皿、载玻片、盖玻片、三角瓶、量筒、吸管、广口瓶. 4试剂 氨苄青霉素(ampicillin)、五氯硝基苯(PCNB)、次氯酸钠(NaCIO)、苯莱特(benomyl)、多菌灵 (carbendazim)、硝酸钙[Ca(NO3)2]、磷酸二氢钾(KH2PO4)、硝酸镁[Mg(NO3)2]、氯化钙(CaCl2)、利 福平(rifampicin)、碳酸钙(CaCO3)、无水乙醇(ethanol). 5培养基 5.1基础培养基 用于隐地疫霉菌的保存和培养性状的观察、测定. 采用胡萝卜培养基(CA)、V.培养基(VA)或利马豆培养基(LBA) 其配制方法及步骤见第B.1章. 5.2选择性培养基 用于隐地疫霉菌游动孢子的萌发、病原菌的分离和纯化. 1000L基础培养基经常规灭菌并冷却到55℃左右时加入下列抗菌素（均为有效成分）：氨卞青霉 素50mg、利福平20mg、多菌灵25mg、五氯硝基苯25mg 摇匀，制成平皿. 在缺乏五氯硝基苯时可用相同药量的苯来特替代. 1 ...
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