SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2120-2008 流行性溃疡综合症检疫技术规范 Protocol of quarantine for epizootic ulcerative syndrome 2008-09-04发布 2009-03-16实施 中华人民共和国 发布 数码防伪色 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2120-2008 前言 本标准修改采用国际兽疫局(OIE)《水生动物疾病诊断手册》2006版中第2.1.10章，对PCR中样 品处理以及试验条件进行了调整和优化. 本标准的附录B是规范性附录，附录A是资料性附录. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检 疫局. 本标准主要起草人：史秀杰、邱杨、何俊强、刘荭、高隆英、杨锦舜、江育林. 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准. SN/T2120-2008 流行性溃疡综合症检疫技术规范 1范围 本标准规定了各种淡水与半咸水鱼流行性溃疡综合症的诊断方法. 本标准适用于各种淡水与半咸水鱼流行性溃疡综合症的检疫. 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-2008 1SO3696:1987 MOD) 3概述 流行性溃疡综合症(Epizootic Ulcerative Syndrome)是由丝囊霉菌(Aphanomyces invadans或者 A.iscicida)引起的野生及养殖的淡水与半咸水鱼类的季节性流行病，也叫做红点病(RSD)、霉菌性肉 芽肿(MG)、霉菌性溃疡(UM) 主要特征是在体表出现溃疡，骨骼肌中形成典型的霉菌性肉芽肿，简称 EUS(参见附录A). 4试剂和材料 4.1水：用于PCR(包括核酸抽提)的水要用DEPC处理，以除去DNA酶和RNA酶，其余用水应符合 GB/T6682一级水的规格. 4.2Taq酶：一20℃保存，不要反复冻融或温度剧烈变化. 4.3 dNTPs:含dCTP、dGTP、dATP、dTTP各10mmoL/L. 4.4引物：一对引物，浓度为40μmol/L. 序列为： FP1:5’-AAG-GCT-TGT-GCT-GAG-CTC-ACA-CTC-3’ FP2:5’-GAT-GGC-TAA-GGT-TTC-AGT-ATG-TAG-3'’ 扩增丝囊霉菌1TS1rDNA基因中的98bp的DNA片断. 扩增产物的参考序列： 1 aaggcttgtg ctgagctcac actcggctag ccgaaggttt cgcaagaaac 51 cgatgtactt ttaatccctt taaactacat actgaaacct tagccatc 4.5无水乙醇：分析纯，使用前预冷到一20℃. 4.610%福尔马林. 4.7酒精：70%、80%、95%及无水酒精. 4.8二甲苯. 4.9中性树脂. 4.10石蜡. 4.11 Harris氏苏木精染液. 4.120.5%伊红酒精溶液. 4.131%盐酸酒精溶液. ...
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