SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3567.10-2017 交叉引物恒温扩增检测方法 第10部分:炭疽芽孢杆菌 Detection method of crossing priming isothermal amplification- Part 10:Anthracnose 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 耐冰查真伪 SN/T3567.10-2017 前言 SN/T3567《交叉引物恒温扩增检测方法》分为11个部分: ——第1部分:通用技术规程; ——第2部分:霍乱弧菌; —第3部分:大肠杆菌O157:H7; —第4部分:黄热病毒; —第5部分:沙门菌属; ——第6部分:结核分枝杆菌; —第7部分:肠道病毒71型; —第8部分:疟原虫; ——第9部分:鼠疫耶尔森菌; ——第10部分:炭疽芽孢杆菌; ——第11部分:志贺菌. 本部分为SN/T3567的第10部分. 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本部分起草单位:中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫 局、杭州优思达生物技术有限公司. 本部分主要起草人:王馨、鞠文东、赵辉、原静、李浩辰、祁军、胡林、尤其敏. I SN/T3567.10-2017 交叉引物恒温扩增检测方法 第10部分:炭疽芽孢杆菌 1范围 SN/T3567的本部分规定了国境口岸炭痘芽孢杆菌交叉引物恒温扩增法检测的对象、检测程序及 检测结果的报告. 本部分适用于炭痘芽孢杆菌筛查检测,以及对国境口岸感染炭疽芽孢杆菌或疑似被炭宜芽孢杆菌 污染的物品实验室检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T1214一2003国境口岸处理炭疽杆菌污染可疑物品操作规程 SN/T2358一2009国境口岸炭疽芽孢杆菌荧光定量PCR检测方法 人间传染的病原微生物名录(卫生部2006) 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 交叉引物恒温扩增技术crossing priming isothermal amplification;CPA 一种核酸恒温扩增技术,CPA恒温扩增体系中除包含具有链置换功能的DNA聚合酶(DNA Poly- merase)外,还主要包括交叉引物、剥离引物和检测引物.这些寡聚核酸链能依靠该DNA聚合酶的 高活性的链置换特性,使脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid DNA)的循环扩增能不断的实现. 3.2 交叉引物crossing primer 用于交叉扩增的主要引物,其中正向引物的5’末端序列与反向引物的杂交序列相同,而反向引物 的5’末端序列与正向引物的杂交序列相同,因此在扩增过程中这两条引物互相引人对方的杂交序列, 增加引物的杂交位点,促进扩增反应. 3.3 剥离引物bumper primer 位于交叉扩增引物后方的短链引物,其作用是在链置换DNA聚合酶的作用下,将扩增引物的延伸 链从模板上剥离. 3.4 检测引物detection primer 一对位于交叉引物内侧的短链引物,需要用半抗原或荧光素标记,其作用是...
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