SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4749-2017 犬传染性肝炎检疫技术规范 Quarantine protocol for infectious canine hepatitis 2017-05-12发布 2017-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4749-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局. 本标准主要起草人：熊炜、张舒亚、王艳、张强、蒋静、王巧全、李健、黄忠荣. SN/T4749-2017 犬传染性肝炎检疫技术规范 1范围 本标准规定了犬传染性肝炎PCR和Real-time PCR检测的操作方法. 本标准适用于犬传染性肝炎流行病学调查、诊断、检疫和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3概述 犬传染性肝炎(infectious canine hepatitis ICH)是由犬传染性肝炎病毒(infectious canine hepatitis virus ICHV)引起的急性败血性传染病，以马鞍型高热，严重血凝不良，肝脏受损，角膜混浊等为主要临 床特征.本病发生没有季节性，各种年龄和品种的犬均可感染、但以断乳后至1岁以内的犬多发，6周 龄~7周龄的犬发病率和致死率最高.ICHV还可引起熊狐的脑炎.犬传染性肝炎病毒(ICHV)又称 为I型犬腺病毒(Canine adenovirus type I.CAV-) ICHV无囊膜，核衣壳直径为70nm~80nm 呈二 十面体立体对称，其基因组为线状双链DNA 长约30kb~31kb 有30个开放读码框，基因组大小在不 同的血清型存在差异. 4试剂和材料 4.1Taq酶及10倍Taq酶反应缓冲液：Taq酶浓度为5U/uL 一20℃保存，避免反复冻融. 4.2dNTP:含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10mmol/L 一20℃保存. 4.3PCR引物：浓度为20μmol/L 扩增基因片段大小为510bp 其序列如下： 引物(ICHVF):5'GCA AGC AGT TCA ACC TCC AGC3'; 引物(ICHVR):5'GGT CCA GTC CAT AGA GTT ACA G3’. 4.4Real-time PCR的引物和探针：引物浓度为20μmol/L 探针浓度为10μmol/L 其序列如下： 上游引物(TICHVF):5’TCC CTG CCA ACA CTA CAA ACC TA3’; 下游引物(TICHVR):5'GGT AAA GCT CCA CCC TCT GAA TC3’. TagMan探针(ICHV-P):5'CCA TTC CTG CCA GAA ATT GGG CC3’ 其5’端和3’端分别标 记FAM和TAMRA. 4.5DNA分子量标准：适合检测分子量大小100bp~1000bp间的DNA片段，一20℃保存. 4.6生理盐水：常温保存（见A.1). 4.710%十二烷基硫酸钠：常温保存（见A.2). 4.8蛋白酶K贮备液：4℃保存（见A.3). 4.95×TBE电泳缓冲液：常温保存（见A.4). 1 ...
SN/T 4749-2017 大传染性肝炎检疫技术规范.pdf
