SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3567.7-2017 交叉引物恒温扩增检测方法 第7部分:肠道病毒71型 Detection method of crossing priming isothermal amplification- Part 7:Enterovirus 71(EV71) 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T3567.7-2017 前言 SN/T3567《交叉引物恒温扩增检测方法》分为11个部分: ——第1部分:通用技术规程; ——第2部分:霍乱弧菌; —第3部分:大肠杆菌O157:H7; ——第4部分:黄热病毒; —第5部分:沙门菌属; —第6部分:结核分枝杆菌; ——第7部分:肠道病毒71型; ——第8部分:疟原虫; —第9部分:鼠疫耶尔森菌; ——第10部分:炭疽芽孢杆菌; ——第11部分:志贺菌. 本部分为SN/T3567的第7部分. 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本部分起草单位:中华人民共和国天津出入境检验检疫局、杭州优思达生物技术有限公司. 本部分主要起草人:李智慧、柴宏森、田卉、祁军、胡林、尤其敏. SN/T3567.7-2017 交叉引物恒温扩增检测方法 第7部分:肠道病毒71型 1范围 SN/T3567的本部分规定了在国境口岸肠道病毒71型交叉引物恒温扩增法检测的对象、检测程 序及检测结果报告. 本部分适用于在国境口岸对肠道病毒71型的快速筛查检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 人间传染的病原微生物名录(卫生部2006) 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 交叉引物恒温扩增技术cross priming isothermal amplification;CPA 一种核酸恒温扩增技术,CPA恒温扩增体系中除包含具有链置换功能的RNA聚合酶(RNA Poly- merase)外,还主要包括交叉引物、剥离引物和检测引物.这些寡聚核苷酸链能依靠该RNA聚合酶的 高活性的链置换特性,使RNA的循环扩增能不断地实现. 3.2 交叉引物cross primer 用于交叉扩增的主要引物,其中正向引物的5’末端序列与反向引物的杂交序列相同,而反向引物 的5’末端序列与正向引物的杂交序列相同,因此在扩增过程中这两条引物互相引入对方的杂交序列, 增加引物的杂交位点,促进扩增反应. 3.3 剥离引物bumper primer 位于交叉扩增引物后方的短链引物,其作用是在链置换DNA聚合酶的作用下,将扩增引物的延伸 链从模板上剥离. 3.4 检测引物detection primer 一对位于交叉引物内侧的短链引物,需要用半抗原或荧光素标记,其作用是使扩增产物带有该标 记,以用于检测. ...
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