SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2120-2014 代替SN/T21202008 流行性溃疡综合症检疫技术规范 Quarantine protocol for epizootic ulcerative syndrome 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T2120-2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准代替SN/T2120一2008《流行性遗疡综合症检疫技术规范》. 本标准与SN/T2120一2008相比，主要技术变化如下： ——增加了采样； ——增加了临床症状； ——对诱导次级游走孢子进行了修改； 一对PCR中样品的处理方法进行了修改； —对PCR试验引物进行了修改； 一对PCR试验条件进行了调整和优化； ——对结果判定进行了修改. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民 共和国广东出入境检验检疫局. 本标准主要起草人：史秀杰、邱杨、于力、贾鹏、王津津、郑晓聪、刘建丽、何俊强、兰文升、刘荭、赵丽. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： -SN/T2120-2008. I SN/T2120-2014 流行性溃疡综合症检疫技术规范 1范围 本标准规定了各种淡水与半咸水鱼流行性溃疡综合症的病原分离、鉴定及诊断方法. 本标准适用于各种淡水与半咸水鱼流行性溃疡综合症的检疫和疫病监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出人境动物检疫采样 GB19489实验室生物安全通用要求 3概述 流行性溃疡综合症(Epizootic Ulcerative Syndrome) 又称红点病(RSD)、霉菌性肉芽肿(MG)、霉 菌性溃疡(UM) 是由丝囊霉(Aphanomyces invadans或者A.piscicida)引起的野生及养殖的淡水与半 咸水鱼类的季节性流行病，主要表现为侵人性丝囊霉感染和坏死性溃疡病变，特征性地引起肉芽肿性反 应，简称EUS(参见附录A). 4试剂和材料 4.1水：用于PCR(包括核酸抽提)的水要用DEPC处理，以除去DNA酶和RNA酶.其余用水应符合 GB/T6682一级水的规格. 4.2丝囊霉参考株：由指定单位提供. 4.3 Tag DNA聚合酶：一20℃保存，不要反复冻融或温度剧烈变化. 4.4 dNTPs:含dCTP、dGTP、dATP、dTTP各10mmol/L. 4.5引物：两对引物，浓度为40μmol/L 序列为： Ainvad-2F:5'-TCA-TTG-TGA-GTG-AAA-CGG-TG-3’ Ainvad-ITSR1:5'-GGC-TAA-GGT-TTC-AGT-ATG-TAG-3’ 扩增丝囊霉ITS1rDNA基因中的234bp的DNA片断. ITS11:5'-GCC-GAA-GTT-TCG-CAA-GAA-AC-3’ ITS23:5'-CGT-ATA-GAC-ACA-AGC-ACA-CCA-3’ 扩增丝囊霉ITS1rDNA基因中的550bp的DNA片断. 4.6无水乙醇：分析纯，使用前预冷到一20℃. 4.710%福尔马林. 4.8酒精：70%、80%、95%及无水酒精. 1 ...
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