SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2368-2009 番茄斑萎病毒检疫鉴定方法 Quarantine identification of tomato spotted wilt virus 2009-09-02发布 2010-03-16实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T2368-2009 前言 本标准的附录B、附录C、附录D、附录E均为规范性附录,附录A为资料性附录. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准由中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局负 责起草. 本标准主要起草人:王秀芬、姜丽、刘伟、刘跃庭、王有福、刘善斌、周铭. 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准. SN/T2368-2009 番茄斑萎病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了进境植物检疫中对番茄斑萎病毒的检疫鉴定方法. 本标准适用于进境种子、苗木等植物性繁殖材料中番茄斑萎病毒的检疫鉴定. 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件,其随后 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准. SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样 3原理 3.1学名与分类地位 学名:Tomato spotted wilt virus 缩写:TSWV 分类地位:布尼安病毒科(Bunyaviridae) 番茄斑萎病毒属(Tospovirus). 3.2检疫鉴定依据 番茄斑萎病毒的血清学特性、分子生物学特性和生物学特性是检疫鉴定的主要依据. 其他资料参见附录A. 4仪器设备、用具及试剂 4.1仪器设备 酶联检测仪、天平(感量,1/10000g)、PH计、微量榨汁机、PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、 隔离温室、恒温水浴、低温冰箱等. 微量移液器(2uL 10L 20L 100L 200pL 1000L)、酶联板、研钵、eppendorf管、花盆、消毒 土等. 4.2试剂 酶联免疫吸附测定试剂(见附录B)、RT-PCR检测试剂(见附录C). 5抽样与样品制备 5.1抽样 抽样按照SN/T2122的规定执行. 5.2种子样品制备 将种子(重点挑取畸形、不成熟的种子)播于灭菌土中,于25℃生长并进行症状观察.待长出 3片~4片叶后将表现症状的植株编号,未表现症状的植株分组(10株为1组)并编号.采集叶片用于 酶联免疫测定、RT-PCR检测及生物学测定. 5.3苗木样品制备 将苗木种植于隔离温室中,于25℃生长并进行症状观察.有症状的苗木单独检测.没有症状的分 组检测,分组方法和检测方法同5.2. ...