SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4462-2016 国境口岸01群和0139群霍乱弧菌和 霍乱肠毒素三重实时PCR的检测方法 Detection method for O1 serotype、O139 serotype vibrio cholera and enterotoxin by triplex real-time fluorescence PCR at frontier port 2016-03-09发布 2016-10-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 别家层查真伪 SN/T4462-2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国珠海出入境检验检 疫局. 本标准主要起草人:周冬根、王燕、李红、孙大为、郑剑宁、裘炯良、倪敏君、张升、张、杨天赐、 莫秋华. I SN/T4462-2016 国境口岸01群和0139群霍乱弧菌和 霍乱肠毒素三重实时PCR的检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸O1群和O139群霍乱弧菌以及霍乱肠毒素基因三重实时PCR检测方法检 验的对象、标本采集、检验程序及结果判定报告. 本标准适用于国境口岸对01群和0139群霍乱弧菌以及霍乱肠毒素基因的实验室检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB19489实验室生物安全通用要求 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 O1群霍乱弧菌O1 serotype vibrio cholera 菌体抗原由3种抗原因子A、B、C组成,又可分为3个血清型:小川型、稻叶型和彦岛型.根据表型 差异,O1群霍乱弧菌的每一个血清型还可分为2个生物型,即古典生物型和E1To生物型. 3.2 O139群霍乱弧菌O139 serotype vibrio cholera 其临床表现及传播方式上与01群霍乱弧菌完全相同,但不能被1群霍乱弧菌诊断血清所凝集, 抗01群的抗血清对0139菌株无保护性免疫.在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长. 3.3 霍乱肠毒素vibrio cholera enterotoxin 是目前已知的致泻毒素中最为强烈的毒素,是肠毒素的典型代表.作用于肠细胞膜表面上的受体, 导致肠黏膜细胞分泌功能大为亢进,使大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻. 4检测对象 4.1疑似病人的排泄物、呕吐物. 4.2被霍乱弧菌污染或有霍乱弧菌污染嫌疑的交通工具、行李、货物、集装箱、邮包、饮用水、压舱水、污 水、餐饮用具、生活用品. 5主要仪器设备 本方法使用的主要仪器如下: 1 ...