SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4463-2016 国境口岸布鲁氏菌荧光PCR检测方法 Test of Brucellosis with real-time PCR at frontier port 2016-03-09发布 2016-10-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 制涂层查真伪 SN/T4463-2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国浙江出入境检验检疫局. 本标准主要起草人:吴忠华、吕沁风、郑伟、罗鹏、徐琦、何蕾、李莉、蔡玉峰、杨永耀. I SN/T4463-2016 国境口岸布鲁氏菌荧光PCR检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸布鲁氏菌的荧光PCR检测方法. 本标准适用于国境口岸感染布鲁氏菌的人或动物以及被该菌污染的物品的荧光PCR检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. WS269布鲁氏菌病诊断标准 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid) dNTP:脱氧核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate) PCR:聚合酶链反应(polymerase chain reaction) 4对象 4.1疑似感染布鲁氏菌的出人境人员或动物. 4.2疑似污染布鲁氏菌的物品. 5生物安全要求 有关布鲁氏菌的实验室操作应按照以下规定执行: 一大量活菌操作或动物感染实验在生物安全三级(BSL-3或ABSL-3)实验室内进行; 一布鲁氏菌标本检测操作在生物安全二级(BSL-2)实验室内进行; 一布鲁氏菌相关的无感染性的材料操作在生物安全一级(BSL-1)实验室内进行; —一布鲁氏菌感染性材料运输包装分类为A类,UN编号为UN2814. 6试剂 在实验过程中需要以下试剂: ——引物和探针: 上游引物BRF1:5'-caagggcaaggtggaagatt-3'; 下游引物BRR1:5'-ctgcgaccgatttgatgttt-3'; 荧光探针FPBR1:5'-fam-atcgtttccgggtaaagcgtcgcca-P-3'; 1 ...