SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4465-2016 国境口岸土拉热弗朗西丝菌荧光 PCR检测方法 Test of Francisella tularensis with real-time PCR at frontier port 2016-03-09发布 2016-10-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 利涂层查真伪 SN/T4465—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国浙江出入境检验检疫局. 本标准主要起草人:吕沁风、吴忠华、郑伟、罗鹏、何蕾、徐琦、李莉、杨永耀、蔡玉峰、周健青、沈若川. I SN/T4465-2016 国境口岸土拉热弗朗西丝菌荧光 PCR检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸土拉热弗朗西丝菌的荧光PCR检测方法. 本标准适用于国境口岸感染土拉热弗朗西丝菌的人或动物荧光PCR检测. 2缩略语 下列缩略语适用于本文件. DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid) dNTP:脱氧核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate) EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid) PCR:聚合酶链反应(polymerase chain reaction) SDS:十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate) Tris-HCl:三羟甲基氨基甲烷盐酸盐[tris(hydroxymethyl)aminomethane-HCl] 3对象 检测对象为国境口岸疑似被土拉热弗朗西丝菌感染的人或动物. 4生物安全要求 有关土拉热弗朗西丝菌的实验室操作应按照以下规定执行: 一大量活菌操作或动物感染实验在生物安全三级(BSL-3或ABSL-3)实验室内进行; —一土拉热弗朗西丝菌标本检测操作在生物安全二级(BSL-2)实验室内进行; 一土拉热弗朗西丝菌相关的无感染性的材料操作在生物安全一级(BSL-1)实验室内进行; 一土拉热弗朗西丝菌感染性材料运输包装分类为A类,UN编号为UN2814. 5材料和设备 在实验过程中需要如下仪器设备: —荧光定量PCR仪; —台式高速离心机(≥10000g); ——旋涡混合器; —移液器:量程0.1L~2.5L 量程1gL~10L 量程10L~100uL 量程100L~1000μL 6试剂 在实验过程中需要以下试剂: 1 ...