SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4545.1-2016 商品化试剂盒检测方法 沙门氏菌方法一 Commercial kit method-Salmonella-Test method I 2016-08-23发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 副除墨查真伪 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T4545.1-2016 前言 本部分是SN/T4545的第1部分. 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本部分起草单位:中华人民共和国福建出入境检验检疫局、广州华峰生物科技有限公司. 本部分主要起草人:邵碧英、郑晶、董健、陈彬、黄晓蓉、彭华毅、林杰. I SN/T4545.1-2016 商品化试剂盒检测方法 沙门氏菌方法一 1范围 SN/T4545的本部分规定了食品中沙门氏菌的环介导恒温核酸扩增(LAMP)检测方法. 本部分适用于家禽、鱼类和海产品、乳制品和杂品中沙门氏菌的筛选检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法 SN/T3266食品微生物检验方法确认技术规范 3生物安全措施 为了保护实验室人员的安全和防止污染,应由具备资格的工作人员检测沙门氏菌.培养物、 DNA提取物和废弃物应按照GB19489和GB/T27403中的有关规定执行. 4技术概要 利用环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification LAMP)技术进行沙门氏菌的筛选 检测.根据沙门氏菌属特有靶序列上的6个独立区域,采用4条特异引物及一种链置换活性的DNA 聚合酶,在65℃左右完成恒温扩增.在环介导恒温扩增反应中,产生肉眼可见的副产物焦磷酸镁乳白 色沉淀,反应产物在荧光染料的作用下,阴阳性结果产生显色差异,即可通过颜色变化观察判定结果. 5试剂和材料 5.1沙门氏菌核酸LAMP检测试剂盒 本试剂盒参考SN/T2775和SN/T3266由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会组 织评价.具体评价结果参见附录A.试剂盒组成如下: a)DNA提取液. b)沙门氏菌HF反应管:为环介导恒温扩增反应管,每管内含22.5L工作液(包括反应液及Bst DNA聚合酶),2μL显色液和50μL稳定液. 1 ...
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