SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4729-2016 杜鹃芽枯病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Seifertia azaleae (Peck)Partridge and Morgan-Jones 2016-12-12发布 2017-07-01实施 3 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 刮涂层查真伪 SN/T4729—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院. 本标准起草人:吴品珊、杜洪忠、雷荣、邵思、严进、张秋娥. I SN/T4729-2016 杜鹃芽枯病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了杜鹃芽枯病菌的检疫鉴定方法. 本标准适用于针对杜鹃属(Rhododendron L.)植物的花芽、叶芽和嫩枝中携带的杜鹃芽枯病菌的 检疫鉴定. 2病菌的基本信息 学名:Seifertia azaleae(Peck)Partridge and Morgan-Jones 英文名:Bud blight Bud and twig blight 分类地位:真菌界Fungi 子囊菌门Asycota 散囊菌纲Eurotiomycetes 刺盾炱目Chaetothyri- ales 小蔓毛壳科Herpotrichiellaceae. 传播途径:病菌主要在病芽上存留或越冬.翌年由芽鳞基部侵入寄主,并进入髓部,阻碍梢枝水分 输导,使芽、梢枯萎.近距离主要由媒介昆虫如叶蝉、蜜蜂等和雨水滴溅传播.远距离传播主要通过带 病植株传播. 杜鹃芽枯病菌的其他信息参见附录A. 3方法原理 以杜鹃芽枯病菌的形态学特征和ITS基因序列比对特征为鉴定依据. 4仪器设备和用具 4.1仪器设备 生物显微镜(具测量功能)、体视显微镜、超净工作台、生物培养箱、天平、高压灭菌锅、台式高速离心 机、PH计、水浴箱、PCR扩增仪、电泳仪、凝胶成像仪. 4.2用具 烧杯、锥形瓶、量筒、试管、培养皿、酒精灯、镊子、剪刀、解剖刀、接种针、载玻片、盖玻片、塑料研杵、 移液器、移液器吸头、离心管、液氮罐. 5试剂和培养基 5.1试剂 葡萄糖、琼脂粉、次氯酸钠、硫酸链霉素、液氮、Tris-HCl、MgCl2、HCl、EDTA、NaOH、NaOAC、 KCl、Tris、CTAB、TAE、无水乙醇(Ethanol)、苯酚(Phenol)、溴化乙锭(EB)、氯仿(Chloroform)、异丙醇 (Isopropanol)、异戊醇(Isoamyl alcohol)、蛋白酶K、Tag DNA聚合酶、dNTPs、引物ITS5/ITS4. 1 ...
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