SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4734-2016 雪松疫霉根腐病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Phytophthora lateralis Tucker et Mibrath 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国发布 3 国家质量监督检验检疫总局 制展查真伪 SN/T4734-2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布结构不承担识别这些专利的责任. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国昆山出入境检验检疫局、南京农业大学、中华人民共和国江苏出 入境检验检疫局. 本标准主要起草人：纪睿、张正光、廖太林、李百胜、王建生、安榆林、吴翠萍. SN/T4734-2016 雪松疫霉根腐病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了雪松疫霉根腐病菌(Phytophthora lateralis Tucker&Milbrath)的检疫鉴定方法. 本标准适用于进出境苗木、原木、木材、木质包装等植物材料及其土壤和介质中雪松疫霉根腐病菌 的检疫和鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样 3雪松疫霉根腐病菌基本信息 学名：Phytophthora lateralis Tucker&.Milbrath 分类地位：藻菌界(Chromista) 卵菌门(Oomycota) 霜霉目(Peronosporales) 腐霉科(Pythiaceae) 疫霉 属(Phytophthora). 雪松疫霉根腐病菌的其他信息参见附录A. 4方法原理 在病原菌分离培养的基础上，对分离的病菌在形态上进行分析以及进行巢式PCR检测，通过电泳 条带大小进行结果判定. 5仪器设备和主要试剂 5.1仪器设备 PCR仪、超净工作台、灭菌锅、制冰机、高速冷冻离心机、台式小型离心机、常规冰箱、涡旋振荡器、 微量进样器、电泳仪、凝胶成像系统. 5.2主要试剂 除另有规定外，试剂均为分析纯和生化级试剂.实验用水为超纯水，规格符合GB/T6682相 关规定. V8汁、碳酸钙、琼脂粉、青霉素、利福霉素、五氯硝基苯、溴化十六烷基三甲铵(CTAB)、十二烷基硫 酸钠(SDS)、无水乙醇、苯酚、氯仿、异戊醇、醋酸钠、RNase、氢氧化钠、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、PCR 缓冲液、氯化镁、dNTPs(含dATP、dTTP、dCTP、dGTP)、Tag DNA聚合酶、引物T1/T2、引物T3/T4、 DL2000标记物、电泳缓冲液、琼脂糖、溴化乙锭(EB). 1 ...
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