SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4739—2016 致病性嗜水气单胞菌检疫技术规范 Quarantine protocol for pathogenic Aeromonas hydrophila 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 400235 别除层查真伪 SN/T4739-2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中国药科大学. 本标准主要起草人:姜焱、童明龙、赵晓燕、王凯民、张扬、褚卫华. I SN/T4739-2016 致病性嗜水气单胞菌检疫技术规范 1范围 本标准规定了致病性嗜水气单胞菌的分离培养和聚合酶链式反应检测方法. 本标准适用于患病鱼类及水样中致病性嗜水气单胞菌的分离、鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. PCR:聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction) Aero:气单胞菌气溶素(Aerolysin) SDS:十二烷基硫酸钠(Sodium Dodecyl Sulfate) 4致病性嗜水气单胞菌分离鉴定 4.1嗜水气单胞菌的分离 4.1.1培养基制备 4.1.1.1各种培养基的制备方法见附录A.试验用水应符合GB/T6682要求 4.1.1.2各种试剂的制备方法见附录B. 4.1.2待检样本 4.1.2.1未污染病料:无菌采取易感动物的肾、肝、脾等组织. 4.1.2.2污染病料:采取粪便或病变皮肤等污染病料. 4.1.2.3水样:采取患病鱼养殖水样500mL. 4.1.2.4菌株:先将菌株接种于普通肉汤(见附录A) 28℃培养24h 再划线接种于普通琼脂平板(见 附录A) 使之形成单个菌落,以供鉴定用.分离鉴定的流程示意图参见附录C. 4.1.3分离培养 4.1.3.1未污染病料的分离 4.1.3.1.1接种环(铂金耳)火焰灭菌,冷却. 4.1.3.1.2用接种环蘸取病料. 4.1.3.1.3划线接种于普通琼脂平板. ...