SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3424-2012 黄瓜细菌性角斑病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Pseudomonas syringae pv.lachrymans 2012-12-12发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3424-2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局. 本标准主要起草人:赵文军、陈青、田茜、牟海青、陈红运、鲁洁、李玲、王哲. I SN/T3424-2012 黄瓜细菌性角斑病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了黄瓜细菌性角斑病菌的样品制备、检测方法、结果判定及菌株保藏等. 本标准适用于可能携带黄瓜细菌性角斑病菌的黄瓜种子、苗木及其产品的检疫鉴定. 2基本信息 学名:Pseudomonas syringae pv.lachrymans 异名:Pseudomonas lachrymans(Smith&.Bryan)Carsner1918 Bacillus lachrymans(Smith&. Bryan)Holland 1920 Bacterium burgeri (Potebnya)Burgvits 1935 Bacterium lachrymans Smith & Bryan 1915 Chlorobacter lachrymans (Smith &Bryan)Patel &Kulkarni 1951 Phytomonas lachrymans (Smith &Bryan)Bergey et al.1923 Pseudomonas lachrymans f.cucumis Gorlenko 1961 Pseudomonas burgeri (Potebnya)Korobko &Nikiforuk 1972 分类地位:细菌界(bacteria) 变形菌门(Proteobacteria) y-变形菌纲(Gammaproteobacteria) 假单 胞菌目(Pseudomonadales) 假单胞菌科(Pseudomonadaceae) 假单胞菌属(Pseudomonas). 传播途径:带菌种子是远距离传播的主要方式,病菌由气孔、伤口、水孔侵入寄主,通过灌水、风雨、 气流、昆虫及农事作业在田间传播蔓延. 黄瓜细菌性角斑病菌的其他信息参见附录A. 3方法原理 根据黄瓜细菌性角斑病菌与抗体之间的特异性反应,对黄瓜种子或产品进行ELISA检测;根据该 病菌DNA序列的多态性进行PCR特异性检测,通过电泳条带大小进行结果判定. 4仪器设备和主要试剂 4.1仪器设备 酶标检测仪、生物显微镜、生物安全柜、高压灭菌锅、生化培养箱、离心机、PCR仪、电泳设备、凝胶 成像系统等. 4.2主要试剂 除另有规定外,试剂均为分析纯.PCR Premix、牛肉膏蛋白胨、胰蛋白胨、K2HPO4、KH2PO、 MgSO4、琼脂,ELISA检测试剂见附录B. 5检疫鉴定方法 5.1检测步骤 对叶片、幼苗等可直接进行5.3 ELISA或5.4PCR检测,对种子可进行5.2种植观察或直接进行 1 ...