SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3437—2012 马铃薯纺锤块茎类病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of potato spindle tuber viroid 2012-12-12发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T3437-2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、中华人民共和国厦门出入境检验检疫 局、中华人民共和国湖北出入境检验检疫局、黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所. 本标准主要起草人:刘洪义、刘忠梅、陈红运、吕典秋、邱彩玲、张洪祥、王振华、杨立群、刘尚武. SN/T3437-2012 马铃薯纺锤块茎类病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了马铃薯纺锤块茎类病毒(potato spindle tuber viroid)的检疫鉴定方法. 本标准适用于检测可能带有马铃薯纺锤块茎类病毒的马铃薯脱毒苗、试管苗、种薯、商品薯、大田中 生长的马铃薯及收获后的块茎、番茄、鳄梨、人参果等其他寄主 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样 3原理 3.1马铃薯纺锤块茎类病毒基本信息 种名:potato spindle tuber viroid 缩写:PSTVd 异名:potato spindle tuber virus potato gothic virus tomato bunchy top virus. 分类:马铃薯纺锤块茎类病毒科(family pospiviroidae.) 马铃薯纺锤块茎类病毒属(Genus Pospivir- oid). 马铃薯纺锤块茎类病毒的其他信息参见附录A. 3.2检疫鉴定依据 PSTVd的基因组特征和在寄主植物上的症状特征是检疫鉴定的依据.PSTVd是一种具有侵染 性、无外壳蛋白、高度碱基配对的棒状共价闭合环状单链小的RNA分子.PSTVd的RNA变性后转变 为开环状分子,这种环状的RNA分子在聚丙烯酰胺凝胶电泳中迁移率比相同相对分子质量的线状分 子要慢得多.依据基因组特征建立往返聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-Polyacrylamide Gel Electrophoresis R-PAGE)、RT-PCR、实时荧光RT-PCR(Real-time PCR)检测方法,这些方法结合寄主 植物症状的有无和症状特征(参见附录A) 判断样品是否带有PSTVd. 4仪器设备、用具及试剂 4.1仪器设备 PCR仪、实时荧光PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、垂直电泳槽、小型离心机、台式冷冻离心机、水浴 锅、凝胶成像系统、制冰机、冷藏冷冻冰箱、电子天平、涡旋振荡器、烘箱等. 1 ...