SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3439-2012 小西葫芦绿斑驳花叶病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of zucchini green mottle mosaic virus 2012-12-12发布 2013-07-01实施 中’华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3439-2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国厦门出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共 和国云南出入境检验检疫局. 本标准主要起草人:陈青、陈红运、陈岩、廖富荣、李旻、林石明. SN/T3439-2012 小西葫芦绿斑驳花叶病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了小西葫芦绿斑驳花叶病毒检疫鉴定的血清学和分子生物学检测方法. 本标准适用于可能携带小西葫芦绿斑驳花叶病毒的葫芦科作物种子和种苗的检疫. 2原理 2.1分类地位 学名:zucchini green mottle mosaic virus 缩写:ZGMMV 分类:烟草花叶病毒属(Tobamovirus) 2.2检疫鉴定依据 抗原特性和基因组特征是检疫鉴定的依据,生物学特性和基因组特征参见附录A. 3仪器、设施及试剂 3.1仪器与设施 酶联检测仪、电子天平(感量0.0O01g)、定性PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、恒温水浴、 低温冰箱、普通冰箱、离心机等;微量移液器(2.5L 10L 20L 100L 200gL 1000μL);酶联板、 研钵等;防虫温室. 3.2试剂 酶联免疫吸附测定试剂(见附录B)、RT-PCR检测试剂(见附录C). 4检测样品的制备 4.1种子样品制备 挑取畸形不成熟的种子播于灭菌土中,置于防虫温室,待长出3~4片真叶后将表现症状的植株编 号单独检测,未表现症状的植株分组(10株为1组)并编号,采集的叶片分成2份,根据需要分别用于酶 联免疫测定和分子检测. 4.2种苗样品制备 有症状(如叶片畸形、花叶、斑驳等)的苗木编号单独检测.没有症状的分组检测,分组方法和检测 方法同4.1. 1 ...