SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3892-2014 麦类壳多胞斑点病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Stagonos pora avenae Bissett f.sp.triticea T.Johnson 2014-01-13发布 2014-08-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T3892-2014 麦类壳多胞斑点病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了麦类壳多胞斑点病菌疫鉴定方法. 本标准适用于进出境小麦、大麦和黑麦种子、组培苗中的麦类壳多胞斑点病菌的鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用子本文件. SN/T1809进出境植物种子检疫规程 3病菌基本信息 学名:Stagonospora avenae Bissett f.sp.triticea T.Johnson;Phaeosphaeria avenaria f.sp.triticea T.W.Johnson1947(有性态). 异名:Septoria avenae A.B.Frank f.sp.Triticea;Leptosphaevia avenaria G.F.Weber f.sp.triticea (有性态). 分类地位:麦类壳多胞斑点病菌(Stagonospora avenae Bissett f.sp.riticea T.Johnson)无性态属于 半知菌亚门(Deuteromycotina) 腔菌纲(Coelomycetes) 球壳孢目(Sphaeropsidales) 壳多孢属 (Stagonospora);有性态属子囊菌门(Asycota) 座囊菌纲(Dothideomycetes) 格孢菌目(Pleospora- les) Phaeosphaeria属. 传播途径:植物残体和种子是远距离传播的主要途径. 病菌的其他信息参见附录A. 4方法原理 麦类壳多胞斑点病菌的形态特征、生物学特性、寄主范围等是该检疫鉴定方法判定的主要依据. 5仪器设备和主要试剂 5.1仪器设备 生物显微镜(具油镜镜头)、具透射光源的体视显微镜(最大放大倍数不低于50×)、超净工作台、电 子天平、光照恒温培养箱、酒精灯、高压灭菌器、培养皿(直径9cm)、医用手术剪、镊子、烧杯(5mL、 10mL)、试管(直径12mm)、载玻片、盖玻片、三角瓶(250mL)、量筒(500mL). 5.2主要试剂 蒸馏水、1%次氯酸钠、PDA培养基、水琼脂培养基、啤酒麦芽琼脂培养基、酵母提取物琼脂培养基、 小麦粉琼脂培养基,配方参见附录B. 1 SN/T3892-2014 6现场检疫 按SN/T1809进行现场检疫,仔细检查寄主植物的叶等部位,是否有叶枯症状.对可疑植物和繁 殖材料应取样送实验室做进一步检验,参见附录A. 7实验室检疫 7.1病原菌检查 用解剖针挑取或刀片刮取病斑或病组织表皮下小黑点制片,在显微镜下观察病菌的分生孢子器和 假囊壳,记录其形态特征,测量分生孢子、子囊和子囊孢子的大小.得到的孢子进行单胞分离纯化. 7.2分离培养 7.2.1组织中病菌的分离 如果发现可疑症状,但不能按7.1获得分生孢子器和假囊壳,应采取下列分离培养的方法作进一步 的鉴定.将病株在自来水流水下冲洗10min~30min 在病斑边缘病健交接处切取0.5cm2左右的小 块,用1%次氯酸钠表面消毒3min ...